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4种虾虎鱼类精子超微结构研究与比较 　　摘要：采用扫描电镜和透射电镜分别对云斑尖塘鳢、线纹尖塘鳢、河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢精子的超微结构进行了比较研究。研究结果显示：在扫描电镜下云斑尖塘鳢、线纹尖塘鳢、河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢精子均由头部和尾部（即鞭毛）组成。2种尖塘鳢鱼类精子头部均为圆球形，而2种沙塘鳢精子头部则为前端略方的长椭圆形；在透射电镜下这4种虾虎鱼的精子均由头部、中段（即颈部）和尾部（即鞭毛）3部分组成。头部细胞核前端无顶体，细胞核后端的植入窝均较浅，中段不明显，包括中心粒复合体和袖套。云斑尖塘鳢和线纹尖塘鳢的袖套中含有6～8个呈环形单层排列的线粒体，河川沙塘鳢和鸭绿沙塘鳢的袖套中含有2～3个线粒体。这4种虾虎鱼类精子尾部的鞭毛细长，轴丝均为典型的“9+2”型结构，轴丝外侧具有较发达的侧鳍。 　　关键词：虾虎鱼；精子；超微结构；电子显微镜 　　中图分类号： S961.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）11-0320-03 　　收稿日期：2014-12-16 　　基金项目：国家星火计划（编号：2013GA690166）；江苏省科技支撑计划（编号：BE2013441）；江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目（编号：2012-NY-032）；海南大学科研基金（编号：kyqd1525）。 　　作者简介：王茜（1982―），女，博士，助理研究员，主要从事鱼类遗传育种研究。E-mail：wangqian170@163.com。 　　通信作者：尹绍，博士，教授，主要从事鱼类遗传育种研究。E-mail：yinshaowu@163.com。云斑尖塘鳢（Oxyeleotris marmoratus，俗称泰国笋壳鱼）和线纹尖塘鳢（Oxyeleotris lineolatus，俗称澳洲笋壳鱼），均隶属于鲈形目（Perciformes）虾虎鱼亚目（Gobioidei）塘鳢科（Eleotridae）尖塘鳢属（Oxyeleotris），分布于东南亚的江河、湖泊及水库中，是塘鳢科乃至虾虎鱼亚目中体型大且生长快的淡水经济鱼类。河川沙塘鳢（Odontobutis potamophila）和鸭绿沙塘鳢（Odontobutis yaluensis），均隶属于鲈形目（Perciformes）虾虎鱼亚目（Gobioidei）沙塘鳢科（Odontobutidae）沙塘鳢属（Odontobutis）。河川沙塘鳢是一种小型经济鱼类，主要分布于我国长江中下游及沿江各支流、钱塘江水系、闽江水系。而鸭绿沙塘鳢是中小型溪流经济鱼类，主要分布于鸭绿江中下游、辽河东部山区支流太子河、大洋河和辽东半岛碧流河[1]。因这4种虾虎鱼均具有肉质细嫩鲜美、营养价值高、无肌间刺等诸多优点，深受广大消费者喜爱。到目前为止，仅见胡亚丽等对云斑尖塘鳢精子的超微结构[2]的报道。本研究采用扫描和透射电镜对这4种鱼类精子的超微结构进行观察比较，为进一步研究虾虎鱼类受精生物学、生殖生理特性等提供基础依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　（1）云斑尖塘鳢雄鱼：2011年4月15日购自海南断山渔业有限公司三亚笋壳鱼繁育基地，空运至南京。水温24～27 ℃暂养10～15 d后，选择体质健壮的雄鱼进行人工催产，剂量为每1 000 g体质量注射LHRH-A2（促黄体生成激素释放激素 　　8～15 μg[2]，或者每1 000 g 体质量注射HCG（人绒毛膜促性腺激素）350～400 IU。（2）线纹尖塘鳢雄鱼：2013年4月2日购自海南断山渔业有限公司三亚笋壳鱼繁育基地，空运至南京。水温24～27 ℃暂养7～10 d后，选择体质健壮的雄鱼进行人工催产，剂量为每尾注射PG（脑垂体） 1 mg+HCG 350～400 IU。（3）河川塘鳢雄鱼：2012年3月15日购自江苏省宝应县射阳湖镇平江村宋泾河流域。水温22～25 ℃暂养7～10 d后进行人工催产，剂量为每1 000 g体质量注射LHRH-A2 5～8 μg+ HCG 200～300 IU。（4）鸭绿沙塘鳢雄鱼：2012年4月12日购自辽宁省抚顺市新宾县太子河流域，在江苏省溧阳市金泉特种水产繁育场暂养20 d左右，于5月2日运回实验室。水温20～23 ℃暂养5～7 d后进行人工催产，剂量为每1 000 g体质量注射LHRH-A2 2～4 μg+ HCG 250～350 IU。 　　达到效应时间后，用干燥的毛巾将雄鱼生殖孔处的水分擦净，轻压鱼体腹部挤出精液，弃去最初挤出的精液，随后用干净的胶头滴管吸取乳白色精液备用。 　　1.2方法 　　1.2.1扫描电镜样品制备扫描电镜样品制备，参照胡亚丽等的制备方法[2]。 　　1.2.2透射电镜样品制备先将精液放在预冷的2. 5%戊二醛中前固定，将精子悬液以1