洁净区沉降菌测标准操作规程.docVIP

SOP-QA-009-02 PAGE 2 of 5 2 洁净区沉降菌监测标准操作规程 SOP-QA-009-02 PAGE 3 of 5 3 目的：建立洁净区中沉降菌的监测规程，保证药品在规定的洁净级别内生产。 适用范围：适用于洁净区沉降菌检测的操作。 责任：QA洁净度监测人员、QC微生物检验员对本标准的实施负责。 内容： 方法概述： 本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判断洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 所用的仪器和设备 2.1高压消毒锅 使用时应严格按照仪器说明书操作。 2.2恒温培养箱 必须定期对培养箱的温度计进行定检。 2.3培养皿 一般采用Φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿；使用前将培养皿置于121℃ 20min。 2.3.1将培养基加热熔化，冷至45℃时，自无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约 2.3.2 待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于30℃—35℃恒温培养箱中培养48h，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿宜在2℃ 2.4 培养基 普通营养琼脂培养基。具体见培养基配置方法。 测试步骤 3.1采样方法 将已制备好的培养皿，按洁净室沉降菌采样点布置图的要求放置，打开培养皿盖，使培 养基表面暴露30分钟，再将培养皿盖盖上后倒置。 3.2培养  SOP-QA-009-02 PAGE 4 of 5 4 3.2.1全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 3.2.2在30℃—35 3.2.3每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对 照培养。 3.3菌落计数 3.3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点记，然后用5—10倍放大镜检查，是否 遗漏。 3.3.2 注意事项 测试用具要作灭菌处理，已确保测试的可靠性，准确性。 采取一切措施防止人为对样本的污染。 对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察, 不漏计培养皿边缘生长的菌落，并注意细菌菌落与培养沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5.1 测试规则 5.1.1沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、 空气流速控制在规定值内。 5.1.2沉降菌测试前，被测试洁净室（区）已经过消毒。 5.1.3 测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。 5.2 测试人员 5.2.1 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。 5.2.2 静态测试时，室内测试人员不得多于二人。 5.3 测试时间 5.3.1 对单向流，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统运行不少于10min后开始。 5.3.2 对非单向流，如10000级，100000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。  SOP-QA-009-02 PAGE 5 of 5 5 5.4.1 采样点数目及其布置 5.4.1.1 最少采样点数目 沉降的最少采样点数可按表1确定。 表1 最少采样点数目 面积S m2 洁 净 度 级 别 100 300000 S＜10 2～3 2 10≤S＜20 4 2 20≤S＜40 8 2 40≤S＜100 16 2 100≤S＜200 40 3 注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对非单向流洁净室，指的是房间面积。 在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见表2。 表 2 最少培养皿数 洁净度级别 所需Φ90mm培养皿数（以沉降30分钟计） 100 14 10，000 2 100，000 2 300，000 2 5.4.1.2 采样点的布置 工作区测试点位置离地0.8—1.5m左右（略高于工作面）。可在关键设备或关键工作活动范围