PTEN基因和Bcl―2基因在广西壮族食管癌患者中表达和临床意义.docVIP

PTEN基因和Bcl―2基因在广西壮族食管癌患者中表达和临床意义 　　摘要：目的：探讨PTEN基因和Bcl-2基因在广西壮族食管癌患者中的表达和临床意义。方法：以2013年1月至2014年12月我院收治的80例食管癌患者的活检标本为研究对象，选取同期80例广西壮族非肿瘤患者的食管黏膜纤维镜活检组织为正常对照组。观察比较PTEN基因和Bcl-2基因在食管癌组织和正常组织中的表达， PTEN基因和Bcl-2基因的表达与食管癌临床病理之间的关系。结果：PTEN和Bcl-2在正常对照组中的阳性率均明显低于食管癌组织中的阳性率（P0.05）。结论：检测PTEN基因和Bcl-2基因可辅助判断食管癌的进展情况和恶性程度，并对食管癌的分子诊断和治疗方案的制定有一定的指导作用。 　　关键词：PTEN基因;Bcl-2基因;广西壮族食管癌患者;临床意义 　　基金项目：2014年右江民族医学院校级课题（【2014】2号） 　　食管癌是发生在食管上皮组织细胞的恶性肿瘤，是引起人类死亡的主要疾病之一[1]。广西壮族居民食管癌的发病率和病死率呈逐年升高的趋势，高于同地区其他民族。为进一步研究壮族食管癌患者基因蛋白表达的差异性与食管癌的发生发展的相关性，阐明壮族食管癌患者发生食管癌的机制，本文以2013年1月至2014年12月我院收治的80例食管癌患者为研究对象，现报告如下。 　　1 资料和方法 　　1.1 病例资料 　　 以2013年1月至2014年12月我院收治的80例食管癌患者的活检标本为研究对象，研究方案经医院伦理委员会批准，所有研究对象均知情同意本研究且签署知情同意书。所有患者术前均经上消化道钡餐造影、胃镜以及病理活检确诊为食管癌，均为壮族，并根据pTNM分期标准进行分段、分期，排除经过放疗、化疗及食管癌根治术的患者。其中，男性患者59例，女性患者21例;年龄43～68岁，平均年龄（58.7±3.5）岁，鳞癌46例，腺癌34例，高分化24例，中分化30例，低分化26例，浸润肌层41例，浸润浆膜层39例，淋巴转移者43例，无淋巴转移者37例，Ⅰ～Ⅱ期45例，Ⅲ～Ⅳ35例。选取同期80例广西壮族非肿瘤患者的食管黏膜纤维镜活检组织为正常对照组。 　　1.2 试剂与方法 　　 鼠抗人Bcl-2单克隆抗体（即用型），PTEN 鼠抗人单克隆抗体。S-P试剂盒。DAB显色剂盒。试剂均购于北京中山生物工程公司。 　　 所有食管组织标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋切片，HE染色和病理组织学确诊。石蜡包埋组织块切片厚4μm，对石蜡切片进行免疫组化链霉素抗生物素蛋白―过氧化物酶（S-P）法测定。依常规免疫组化方法，按试剂盒说明书操作，用已知鼠抗人PTEN 单克隆抗体阳性的结肠腺癌标本作为阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。 　　1.3 实验结果判定标准[2] 　　 PTEN 阳性反应均为黄色或棕黄色颗粒，PTEN 主要定位于细胞浆。综合染色强度和阳性细胞率判定结果。①阳性着色-无色0分，淡黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分;②阳性细胞率-每张切片取5个高借视野（×400），计数肿瘤细胞中的阳性细胞百分率，无阳性细胞为0分、阳性细胞数≤10%为1分，11%～25%为2分，26%～50%为3分，50%为4分。染色强度×阳性细胞百分比3分为阳性，≤3分为阴性。Bcl-2基因多为胞浆染色， 少数为核膜染色，胞浆或核膜着棕黄色为阳性表达，高倍镜下计数5个视野的阳性细胞数和总细胞数，求出阳性细胞的百分率，并规定阳性细胞数lt; 10%为阴性，反之为阳性。 　　3 讨论 　　 食管癌已被公认为一种基因性疾病，是在多种癌基因和抑癌基因共同作用下发生的[3-4]，因此癌基因和抑癌基因在食管癌中的表达及其临床意义受到越来越多学者们的关注，而不同人群存在着民族差异，从而有可能影响到基因遗传差异，本文主要研究PTEN基因和Bcl-2基因在广西壮族食管癌患者中的表达及其临床意义。 　　 PTEN是一种新型抑癌基因，也是人类肿瘤中最常发生突变的抑癌基因之一，其基因与蛋白表达与一些恶性肿瘤的发生与发展存在着密切的联系[5]。Bcl-2基因是一种抑制细胞凋亡的基因，在生理或肿瘤形成的情况下均可通过阻止程序性细胞凋亡从而有利于肿瘤的生长[6]。本文研究结果表明，PTEN和Bcl-2在正常对照组中的阳性率明显低于食管癌组织中的阳性率，两组比较差异均具有统计学意义。说明，PTEN基因和Bcl-2基因在食管癌的发生与发展过程中存在着高表达。目前认为，PTEN在食管癌变过程中有表达缺失现象，使细胞在增殖过程中过度增殖丧失负调控，以致细胞发生癌变[7]，而Bcl-2基因在抑制肿瘤细胞凋亡的方面起到重要的作用，导致肿瘤细胞生长旺盛，不受机体控制。 　　 本文研