ERK信号传导通路在人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化作用中研究进展.docVIP

ERK信号传导通路在人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化作用中研究进展 　　颌面部各种原因导致的不同程度的骨缺损是困扰着整形、正畸以及颌面外科等口腔临床学科的一大难题。骨组织工程技术被认为是最理想的修复骨缺损的生物学方法[1],其中种子细胞的相关研究最为关键。人脐带间充质干细胞可作为种子细胞分化为成骨细胞,不仅在骨组织工程领域具有广阔的应用前景,同时对人脐带间充质干细胞进行深入的研究进一步了解胚胎细胞发育的特性,从而对儿科尤其是颌面儿科,特别是针对先天性唇腭裂患儿骨组织修复有着积极的意义。在间充质干细胞成骨分化过程中,MAPK信号通路是决定性通路之一,其中ERK通路是MAPK家族中与细胞增殖和起始分化密切相关者。本文将回顾近年来关于ERK信号转导途径在人类脐带间充质干细胞向成骨细胞增殖分化作用的研究,并将这一领域的研究进展综述如下: 　　 　　1 ERK信号传导通路 　　1.1 MAPK通路:丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)属于丝/苏氨酸蛋白激酶,存在于大多数生物体细胞胞质内,参与调节细胞的各种生理功能和变化[1]。早在1989年～1991年,学者们就发现了第一组MAP激酶序列,从而发现了一组新的蛋白激酶[2]。MAPK通过有三至五个环节构成的保守三级酶促级联反应(即MAPKKK-MAPKK-MAPK),激活转录因子,促使核内事件的发生。MAPK是通过VIII区域苏氨酸、酪氨酸双位点磷酸化活化和由脯氨酸介导的Ser/Thr蛋白激酶(其同工酶均有最小共同靶序列Ser/Thr-Pro)[3]。目前,MAPK家族有五大类成员,分别为细胞外信号调节激酶(Extracellular-signal regulated protein kinase, ERK)1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)/应激激活蛋白激酶(Stress-activated protein kinase, SAPK)、p38MAPK、ERK5/BMK1 (bigMAP kinase 1)和ERK3/4 等[4]。本文就与成骨细胞的发生关系密切的ERK信号转导通路来进行阐述。 　　1.2 ERK转导通路的主要过程:当细胞外基质与前体细胞(如间充质干细胞)接触,细胞外基质即与表面整合素受体结合,受体异源二聚化,自身磷酸化,粘附斑激酶磷酸化,鸟核苷酸交换因子募集,从而使与Ras结合的GDP脱落而结合GTP,激活Ras,然后通过MAPKKK(MEK)-MAPKK-MAPK途径激活转录因子,促进细胞增殖和分化[5]。ERK信号通路是目前研究较为彻底的MAPK通路之一,是多数生长因子、细胞因子调控细胞增殖分化的重要途径,对其机制的深入研究有利于体外诱导间充质干细胞向成骨细胞的分化,从而有助于骨组织工程学的发展。然而近年来,对骨髓间充质干细胞分化的研究较为普遍,尤其是研究其向神经细胞、肝细胞、脂肪细胞以及成骨细胞的分化等,但对于人脐带间充质干细胞的研究报道则相对较少,研究相对滞后。 　　1.3ERK通路与P38、JNK通路之间的关系:真菌中的MAPK信号通路并无相互作用,其每一条MAPK通路都是相对独立的,一般不会发生交联。但是,在哺乳类细胞中各个MAPK信号通路之间通过复杂的机制既可相互区别,又可相互调节,保持其自身的独立性,同时又相互促进或抑制。ERK、JNK、p38MAPK三条通路,总是可以在不同的作用位点找到相互交汇的地方[6]。Hotokezaka等[7]发现p38抑制剂引起p38磷酸化减少的同时伴随了ERK磷酸化的增加,而MEK抑制剂减少ERK的磷酸化同样也使p38的磷酸化程度增加。Suzuki 等[8] 利用鼠颅骨源的成骨细胞系MC3T 32E1 细胞研究发现, 经过胎牛血清诱导,ERK通路可快速激活, 而p38通路 和JNK通路激活则大大延迟。国内廖清船等[9]实验发现植物雌激素金雀异黄酮可激活p38MAPK通路,但同时抑制ERK通路,而人雌激素则对ERK和p38MAPK通路均有激活作用[10]。关于ERK、p38、JNK三者之间究竟是怎样互相作用与调节,具体作用环节在何处,如何形成交联网络等还有待进一步的阐明。 　　2 ERK信号转导通路与人脐带间充质干细胞 　　2.1人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs):人脐带间充质干细胞是存在于脐带和血管周围组织中的一种干细胞,具有多向分化和自我更新的潜能[11]。自1966年Friedenstein [12]发现骨髓间充质干细胞以来,由于易于培养、扩增和遗传因素相对稳定的特点而常用于科研中。但骨髓间充质干细胞在具有细胞增殖分化能力的同时,其数目随年龄增长而