不同激素水平对虎眼万年青组织培养影响.docVIP

不同激素水平对虎眼万年青组织培养的影响 　　摘要：以虎眼万年青子鳞茎为外植体，以ＭＳ培养基为基本培养基，采用完全随机设计，附加不同浓度的细胞分裂素６－ＢＡ和ＫＴ、生长素ＮＡＡ和ＩＢＡ，研究不同激素水平对虎眼万年青组织培养的影响。实验结果表明，不定芽诱导、增殖最佳培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ ２．０ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ；最佳生根培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ２．０ ｍｇ／Ｌ。 　　关键词：虎眼万年青；激素水平；组织培养 　　中图分类号：Ｑ９４９．７１＋８．２３；Ｑ９４６．８８５；Ｑ９４３．１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）01－0183-02 　　 　　Effects of Different Hormone Levels on Tissue Cultivation of Ornithogalum caudatum 　　 　　ＹＡＮＧ Ｇｕｏ－ｈｕｉ，ＭＩ Ｃｈｕｎ－ｊｉａｎｇ，ＭＩＡＯ Ｃｈｅｎｇ－ｙａｎｇ 　　（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｊｉｌｉｎ １３２１０１， Ｊｉｌｉｎ， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｕｓｉｎｇ ｓｕｂ－ｂｕｌｂｓ ｏｆ Ｏｒｎｉｔｈｏｇａｌｕｍ ｃａｕｄａｔｕｍ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ， ａｎｄ ｂａｓａｌ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ６－ＢＡ ａｎｄ ＫＴ， ａｕｘｉｎ ＮＡＡ ａｎｄ ＩＢＡ， ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｎ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｏ． ｃａｕｄａｔｕｍ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｄｅｓｉｇｎ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ＋６－ＢＡ ２．０ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ； ａｎｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ １／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．２ ｍｇ/ Ｌ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｏｒｎｉｔｈｏｇａｌｕｍ ｃａｕｄａｔｕｍ； hormone content； tissue culture 　　 　　虎眼万年青（Ｏｒｎｉｔｈｏｇａｌｕｍ ｃａｕｄａｔｕｍ），为百合科多年生虎眼万年青属草本植物，主要分布于东半球温带地区，原产于非洲南部，其中我国引入栽培的仅有虎眼万年青一个种［１］。其球茎中含有大量的生物碱及化学成分，已测出的化学成分有２７种之多，具有治疗跌打损伤，活血化淤的功效，现在多用来治疗肝硬化、肝炎等病症。其中皂甙ＯＳＷ－１对肺癌、乳腺癌有明显的抗癌活性［２，３］。近年来我国学者对虎眼万年青化学成分研究逐渐增多，但以虎眼万年青的花茎、花药、鳞片、子叶、子房等部位为材料进行愈伤组织及不定芽诱导的研究较少［４，５］，而以虎眼万年青子鳞茎为外植体诱导完整再生植株的研究更少［６］。 　　通过研究不同激素对虎眼万年青子鳞茎组织培养的影响，确定适合其离体生长的最优培养基配方，为实现工厂化生产提供了可靠的依据。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　诱导、增殖培养基筛选，采用虎眼万年青子鳞茎，２００７年４月采自吉林农业科技学院左家校区；生根培养基筛选，选择苗高３～５ ｃｍ的无根组培苗。 　　１．２方法 　　１．２．１外植体的消毒取虎眼万年青子鳞茎，剥去表皮并用饱和洗衣粉水浸泡２ ｈ，然后用自来水反复冲洗干净，移入超净工作台，用７５％酒精浸泡１ ｍｉｎ，再用０．１％ ＨｇＣｌ２溶液处理１５ ｍｉｎ，无菌水冲洗４～５次［６］。 　　１．２．２培养基①诱导、增殖培养基。以ＭＳ培养基为基本培养基，采用完全随机设计，附加不同浓度的６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＫＴ、ＩＢＡ，形成８个激素配比浓度的培养基（表１）。②生根培养基。采用１／２ＭＳ培养基，附加不同浓度ＮＡＡ，配制３种培养基为Ｃ１． １／２ＭＳ＋ＮＡＡ １．０ ｍｇ／Ｌ，Ｃ２． １／２ＭＳ＋ＮＡＡ ２．０ ｍｇ／Ｌ，Ｃ３． １／２ＭＳ＋ＮＡＡ ３．０ ｍｇ／Ｌ，以上培养基均附加琼脂８ ｇ／Ｌ，蔗糖３％，ｐＨ值调至５．８～６．０，分装后经过１２１℃高温高压蒸汽灭菌２５ ｍｉｎ。 　　１．２．３接种和培养外植体诱导、增殖的培养实验，材料消毒后，去掉鳞茎盘，每个子鳞茎分切成８块接种到培养基上，每支培养瓶接种３块，每个处理接种８瓶，