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不同激素浓度对万代兰及其辐射苗增殖的影响 　　摘要 以万代兰及其辐射无菌苗为材料，探讨不同激素浓度对万代兰及其辐射无菌苗快速繁殖的影响。结果表明：万代兰及其辐射无菌苗增殖以MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.3mg/L+香蕉泥80g/L效果最好，特别是辐射处理后小苗在加入香蕉泥后，增殖率达到150%，且长势较好，叶色嫩绿，褐化现象明显改善。 　　关键词 万代兰；组织培养；辐射；快速繁殖 　　中图分类号 S682.31；S482.8 文献标识码A文章编号1007-5739（2008）12-0007-02 　　 　　万代兰（Vandopsis gigantean Pfitz）属于典型的热带气生兰，原产于泰国、菲律宾和夏威夷等地。在亚洲、大洋洲和南美洲分布广泛，至今发现的原生种共有70多个，而杂交种则更为丰富。万代兰的花较大，花色艳丽，有白、黄、粉红、紫红、茶褐和天蓝等。花序从叶腋间抽出，有花10～20朵，花期长，可开放3～8周，既可作盆栽花卉，又能作切花。花萼片特别发达，尤其2枚侧萼更大，是欣赏的重点，有直立茎干和发达的肉质气生根。叶片在茎的两侧排成两列，通常有扁平、圆柱和半圆柱3种形态[1]。 　　自20世纪中叶以来，万代兰开始在世界各地流行，只要是较为温暖的地区，都可以见其踪影。世界各地的兰花爱好者也培育出了大量的万代兰品种，除了在万代兰属内的种间杂交品种外，还有不少与其他属兰花的属间杂交种，而研究万代兰的快速增殖也是当前热门研究之一[2]。近年来，植物辐射已用于多种植物育种，是以电离辐射使植物的遗传发生变异，然后从后代中选出人们所需要的新品种的一种新型育种方法[3]。经过辐射处理后的植株细胞受到损伤诱发染色体数量结构的变异，在后代遗传中产生突变体，但达到诱变效果的剂量往往造成较大程度的生长、增殖、分化受抑制和大量死亡，常常造成间接的变异率降低[4]。 　　本试验选用万代兰辐射无菌苗作研究材料，使用不同激素浓度对其增殖效果进行研究比较，一方面能够找到正常万代兰的最佳增殖配方，确保万代兰的快速繁殖，同时也具有较好的经济价值；另一方面可以找出万代兰辐射受抑制无菌苗增殖的最佳培养基，提供较多的变异材料，为选育新品种打下良好基础。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1试验材料 　　云南农业大学花卉研究所提供经60Coγ射线辐射处理过和未处理的2种万代兰试管苗。 　　1.2试验时间 　　试验于2006年11月至2007年5月在云南农业大学花卉研究所实验室进行。 　　1.3培养条件 　　控制培养温度25±2℃，光照强度2 000Lx，每天光照12h。 　　1.4试验方法 　　1.4.1不同激素浓度对万代兰及其辐射苗增殖的影响。基本培养基为MS培养基，pH值为5.8。未辐射材料附加激素采用6-BA+NAA组合，当NAA为0.3mg/L时，6-BA设置1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L共5个浓度梯度；辐射材料附加激素采用6-BA+NAA组合，当NAA为0.3 mg/L时，6-BA设置1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L共7个浓度梯度，设置1个对照（只用基本培养基，不添加任何激素）。培养22d后，观察记录生长情况，统计试验数据。 　　1.4.2不同类型培养基对万代兰无菌苗增殖的影响。采用MS基本培养基，激素浓度用6-BA 2.5mg/L+NAA 0.3mg/L，一种类型培养基添加80g/L香蕉泥；一种类型培养基不添加。设置1个对照（只用基本培养基，不添加任何激素）。培养90d后，观察记录生长情况，统计数据。 　　1.4.3不同类型培养基对辐射无菌苗增殖的影响。辐射材料培养基MS+6-BA+NAA+80g/L香蕉泥，当NAA浓度为0.3mg/L时，6-BA设置1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L共7个浓度梯度，设置1个对照（只用基本培养基，不添加任何激素）。培养90d后，观察记录生长情况，统计数据。 　　 　　2结果与分析 　　 　　2.1不同激素浓度对万代兰及其辐射苗增殖的影响 　　将万代兰及其辐射无菌苗分别接入不同激素浓度的培养基内观察其增殖效果。接入时植株长势较好，叶片多，有根，无褐化现象。经过无菌培养22d后，观察统计数据见表1、表2。 　　从表1可以看出，万代兰小苗的增殖数目最多的激素浓度为NAA 0.3mg/L+6-BA 2.5mg/L，增殖率达到13%，且未辐射材料长势好，新发叶片嫩绿。 　　从表2可以看出，辐射材料增殖率几乎为零，死亡率也比对照材料高，无新发叶片，叶片无明显长