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不同发芽阶段对黄芩种苗生物量及活性成分含量变化的研究 　　[摘要]该文主要研究从萌发到移栽5个不同发芽阶段对黄芩种苗生物量及活性成分含量的影响。采集不同发芽阶段的黄芩种苗，测定其根长芽长根径及根重，利用HPLC测定根中的黄芩苷野黄芩苷汉黄芩苷黄芩素汉黄芩素的含量。结果表明，随着黄芩种苗的萌发，黄芩的各个生物学指标均升高，但根部折干率从32.90%下降至27.96%，野黄芩苷和黄芩素的含量均呈现先增加后减少的趋势，在芽/根值为0.35时达到最大，质量分数分别为3.22，3.89mg?g-1，黄芩苷含量在芽/根值为0.23时最高，质量分数为107.39mg.g-1，汉黄芩苷在芽/根值为0.06时含量最高，质量分数为16.11mg.g-1，汉黄芩素则呈现逐渐增加的趋势，在芽/根值为0.50时达到最大值，质量分数为0.88mg?g-1。当芽/根值为0.35时，黄芩种苗中的野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量达到或接近发芽阶段的最大值，可用芽/根值作为黄芩种苗活性成分的判定指标 　　[关键词]黄芩；发芽阶段；生物量；活性成分含量 　　黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，是一种常见中药材，多分布于我国黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、河南、陕西、甘肃、山东、山西、四川等地。黄芩具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效，研究表明，黄芩的主要药用成分有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、野黄芩苷等黄酮类成分，其中黄芩苷具有抗菌、抗病毒、抗氧化等作用，黄芩素具有抗癌、调节血管收缩舒张、抗氧化等作用，汉黄芩素具有调节免疫等功能，而野黄芩苷具有扩张血管，减少血小板计数和抑制血小板凝集等作用。 　　近年来，随着国内外市场对黄芩需求的日益增加，传统的野生黄芩药源已经不能满足市场的需要，栽培黄芩逐渐成为市场的主要商品来源。研究表明，不同发育阶段对黄芩的活性成分含量有显著影响。但不同发芽阶段黄芩种苗中的活性成分含量则无人研究，本文对不同发芽阶段黄芩种苗生长状况及活性成分含量进行分析，为黄芩的规范化栽培及黄芩种苗标准的建立提供依据。 　　1材料 　　药材的采集：采集时间自黄芩幼苗萌芽开始，移栽结束（2015年3月中旬至4月中旬），每间隔1周从莱芜紫光生态园黄芩种苗基地采集不同发芽阶段的黄芩种苗，按照对角线取样法，1条线取3个点，每个点取样20株。材料经山东中医药大学周凤琴教授鉴定为药用植物黄芩S.baicalensis。 　　超声波清洗机（SB-3200DT，宁波新芝生物科技股份有限公司）；游标卡尺（上海申韩量具有限公司）：Agilent 1120高效液相色谱仪（Agilent DAD检测器，Agilent Chemstation工作站）（美国安捷伦公司）、粉碎机（九阳股份有限公司）、分析天平（AE240，METTLER公司）、电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）。 　　甲醇，乙醇，甲酸，甲酸铵，乙腈（色谱纯），娃哈哈纯净水；野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对照品（山东省分析测试中心，纯度98%）。 　　2方法与结果 　　2.1生物学指标的测定 　　除去黄芩根部泥土，用直尺测量芽长和根长，用游标卡尺测量芦头下1cm处的根部直茎。然后将地上部分和地下部分分离，用电子天平上称取根部鲜重，待阴干至恒重后测重，计算根部折干率。 　　2.2活性成分含量的测定 　　2.2.1色谱条件 Inertsil-1色谱柱C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：0.2%甲酸水+10 mmol.L-1甲酸铵（A）-乙腈（B），梯度洗脱：0～5 min，15%B：5～10 min，15%～20%B；10～15 min，20%～23%B；15～17 min，23%～25%B：17～30min，25%～30%B；30～35 min，30%～40%B：35～40 min，40%B；40～41 min，40%～15%B。进样量10 uL，检测波长275 nm。 　　2.2.2对照品溶液的配制 取野黄芩苷0.0017g，甲醇溶解后定容于5 mL量瓶中，黄芩苷0.013 g，甲醇溶解后定容于10 mL量瓶中，汉黄芩苷0.0013g，甲醇溶解后定容于25 mL量瓶中，黄芩素0.0013g，甲醇溶解后定容于5mL量瓶中，汉黄芩素0.0013 g，甲醇溶解后定容于25 mL量瓶中，使质量浓度分别达到0.34，1.3，0.052，0.26，0.052 g?L-1，分别吸取1，2，5.5，1，0.5 mL至10 mL量瓶中。 　　2.2.3供试品溶液的制备 称取黄芩粉末0.50 g，置磨口锥形瓶中，然后加入70%乙醇50 mL，称重，超声提取30 min，提取液过0.45μm微孔滤膜