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不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化现象影响
不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化现象的影响
[摘 要] 香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍。为探讨不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化的影响,以香石竹健壮组培苗为材料,以MS为基本培养基,研究了不同浓度6-BA、蔗糖和琼脂以及添加活性炭对防止香石竹组培苗玻璃化现象的作用。结果表明,降低6-BA的浓度,适当提高蔗糖和琼脂的浓度,组培苗增殖系数较高,玻璃化率低。其中,MS+蔗糖30.0 g+琼脂8.0 g+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.01 mg/L+活性炭4 g/L的培养基可以有效降低香石竹组织培养中的玻璃化现象。
[关键词] 香石竹 继代培养 玻璃化
Abstract: Vitrification is the main obstacle in subculture of carnation plantlets in vitro,which were induced from shoot tips. In order to study the influence of different culture conditions on the carnation somaclone vitrification, with robust carnation somaclone as material, taking MS as the basic culture medium, the effects of different concentrations of 6-BA, sugar and agar and active carbon added on prevention of carnation plantlets vitrification phenomenon were tested. The results showed that low concentration of 6-BA and properly increasing the concentration of sugar and agar, in which somaclone multiplication coefficient is higher and the vitrification rate is low. Therefore, medium with MS+sucrose 30.0 g+agar 8.0 g+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L+ activated carbon 4 g/L can effectively prevent carnation vitrification in tissue culture.
Key words: Carnation, Subculture, Vitrification
[中图分类号] S681.5 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 (2015)11-0090-02
香石竹(Dianthus caryophyllus L.),石竹科石竹属,原产于欧洲南部,现世界各地广泛栽培,我国上海、北京、广州等地区栽培面积较大。香石竹单朵花期较长,花朵雍容富丽,色彩绚丽娇艳,耐瓶插,宜制作花束、花篮,观赏价值极高,是世界著名的四大切花之一[1]。传统生产香石竹主要依靠扦插、分株繁殖,但难以达到大量快速繁殖的目的,并且经过多代繁殖的植株在这种长期营养繁殖过程中,体内会积累大量的病毒原,极易受到病毒侵染,使种源不断退化,严重影响植株的健壮生长[2,3]。近年来我国香石竹组织培养和快速繁殖技术研究开展较早,取得了不少研究成果[4]。然而,尽管香石竹获得再生比较容易,但其再生苗比较纤弱、易发生玻璃化,在植物组织培养中组培苗玻璃化现象及其容易发生,已报道的植物多达70种[5]。由于玻璃苗的组织结构和生理功能异常,故增殖系数低,生根较难,移栽大田难以成活,是植物组织培养的一大难题[6-8]。如何改进培养技术克服玻璃化等问题,是其研究和需克服的难点。
本研究以生长健壮的正常茎尖组培苗为材料,采用单因素随机变量法,初步研究6-BA、琼脂、蔗糖、活性炭等不同组培条件下对茎尖组培苗继代培养过程中玻璃化现象发生的情况,以期为获得大量的香石竹试管苗及改善其质量奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
材料为健壮的香石竹组培苗。
1.2 方法
1.2.1 试验处理
取健壮的香石竹组培苗,以MS为基本培养基,pH值为5.8~6.0,每处理接种20瓶,每瓶3株苗,重复3次,接种后放置在光照强度为: 1000~2000 lx;光照时数12 h/d;培养在(25±1)℃的恒温培养箱中进
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