不明原因肝病患者隐匿性HBV感染检测及意义研究.docVIP

不明原因肝病患者隐匿性HBV感染的检测及意义研究 　　【摘要】 目的：对不明原因肝病患者隐匿性HBV感染进行检测，探究其临床意义。方法：选取2011年2月-2013年8月笔者所在医院入院治疗肝病患者84例，对所有患者HBV进行检测，研究其临床意义。结果：血清HBsAg、抗-HBs、HBeAg以及抗-HBc均为阴性。HBV DNA为阴性。HBV抗原阳性患者32例；HBV抗原阴性患者32例；全阴性患者有20例。肝组织HBsAg表现形式有胞浆均匀和包涵体型，未出现包膜类型，大多呈分散状或者集落性分布；HBcAg大多数表现为胞浆形式，少部分为胞核形式，分布情况与HBsAg相同。84例隐匿性HBV感染患者中，32例为慢性肝炎轻度到中度，炎症G1～G2级分级，其纤维化分期为S0～S3；39例为肝硬化，炎症G3～G4级分级，其纤维化分期为S3～S4；余13例患者诊断为肝细胞性肝癌。结论：HBV感染是不明原因肝病主要发病原因，HBV隐匿性感染和慢性肝炎、肝硬化以及肝癌具有重要联系，应当广泛重视。 　　【关键词】 不明原因； 肝病； 隐匿性； HBV感染； 检测 　　中图分类号 R575 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2014）17-0068-02 　　临床治疗中，大约有5%慢性肝病患者仅仅根据临床症状、常规生化反应以及对其血清进行检测依旧不能查明其发病原因[1]。这一现象在医学界依旧对医生和患者造成严重困扰。近几年，由于PCR以及免疫组织化学技术不断发展且广泛应用，许多患者血清或者患者肝组织HBV DNA阳性以及肝组织HBV抗原呈阳性，是一种隐匿性HBV感染。在我国，隐匿性HBV感染发生率较高，需要引起重视[2]。因此，笔者所在医院对不明原因肝病患者隐匿性HBV感染进行检测，对其进行免疫学研究，得到了一些结论，现报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取2011年2月-2013年8月笔者所在医院入院治疗肝病患者84例。其中男44例，女40例；年龄10～70岁，平均为（30.25±11.2）岁；病程1～7年。84例患者其血清中所存在乙型肝炎病毒相关标志物以及丙型肝炎性病毒相关标志物都表现为阴性。所有患者都无其他病毒性类肝炎、药物性类肝病以及代谢性类肝病等相关病症。对所有患者在超声诊断仪指导下使用弹射式组织活检枪对其进行肝活检。 　　1.2 方法 　　对患者进行血清学检测：HBV-M使用酶联免疫吸附试验法（ELISA）进行检测，血清中HBV DNA使用荧光定量PCR法进行测定（试剂盒来自达安公司）。操作细节均按照试剂盒说明进行，并且依据试剂盒确定判断标准。肝功能测定使用Olympus AU640型自动化分析仪。对患者的肝组织标本进行规范检测：取患者肝组织相关标本使用10%甲醛对其进行规范固定以及脱水，之后使用石蜡对其进行包埋后行5 μm厚度连续性切片处理。对每位患者切片分别行HE染色和免疫组织化学检测。鼠抗-HBsAg单克隆抗体、兔抗-HBcAg多克隆抗体以及免疫组织化学PV-9000试剂盒均来自北京中杉生物技术有限公司。抗-HBs以及抗HBc使用时浓度均为1∶100。所有操作均对照其说明书规范进行，结果对照说明书进行断定。HBsAg阳性细胞为细胞膜或细胞浆棕黄色进行染色。HBcAg阳性细胞当期细胞浆表现为棕黄色染色或者伴随细胞核出现阳性染色。 　　1.3 疗效评价标准 　　经过组织学诊断，慢性肝炎炎症分级（G）以及纤维化分期（S）标准划分根据2000年第十次全国病毒性肝炎以及肝病学会议中进行修订的病毒性肝炎防治计划方案。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 血清学检查 　　血清HBsAg、抗-HBs、HBeAg以及抗-HBc均呈现为阴性。HBV DNA为阴性。 　　2.2 肝活检结果 　　2.2.1 免疫组织化学结果 HBV抗原阳性患者32例，HBV抗原阴性性患者32例，全阴性患者20例。肝组织HBsAg表现形式有胞浆均匀和包涵体型，未出现包膜类型，大多呈分散状或者集落性分布；HBcAg大多数表现为胞浆形式，少部分为胞核形式，分布情况与HBsAg相同。 　　2.2.2 组织学特性 84例隐匿性HBV感染患者中，32例为慢性肝炎轻度到中度，炎症从G1～G2级分级，其纤维化分期为S0～S3；39例为肝硬化，炎症从G3～G4级分级，其纤维化分期为S3～S4；余13例患者诊断为肝细胞性肝癌。 　　3 讨论 　　通常而言，HBsAg不存在表明病毒血症被完全清除。但是近几年研究表明，存