生活饮用水标准检验之方法 微生物指标.pptVIP

生活饮用水卫生标准GB5749-2006 生活饮用水标准检验方法GB5750-2006 微生物指标及微生物检验的介绍 广东省CDC微生物检验所 严纪文;水质非常规指标及限值;生活饮用水水质参考指标及限值 ;一、菌落总数;二、总大肠菌群（埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属） 除多管发酵法、滤膜法外，增加了酶底物检测方法 多管发酵法;滤膜法;酶底物法 酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基：MMO-MUG培养基（Minimal Medium ONPG-MUG）。 本方法可分为定性和定量。 定量法：10管法、51孔定量法 培养条件： 36±1℃ 24h 能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： 可同时判断水样中大肠???群和大肠埃希氏菌 检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h 无需确证试验 操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： 检测成本高;总大肠菌群三种方法的比较;三、耐热大肠菌群（埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌） 检测方法：多管发酵法、滤膜法;四、大肠埃希氏菌 检测方法：多管发酵法、滤膜法、酶底物法 大肠埃希氏菌多管发酵法定义：大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大肠菌群阳性，在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β-葡萄糖酫酸酶，分解荧光底物释放出荧光产物，使培养基在紫外光下产生特征性荧光的细菌，以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：EC-MUG（4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖酫酸苷）。 培养条件：44.5±0.5℃ 培养24±2h。紫外灯：波长366nm，功率6W 大肠杆菌能产生β-葡萄糖酫酸酶分解MUG，菌落在366nm紫外光下产生蓝色荧光 滤膜法定义：用滤膜法检测水样后，将总大肠菌群阳性的滤膜 在含有荧光底物的培养基上培养，能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光，以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：NA-MUG 培养条件：36±1℃ 培养4h 紫外灯：波长366nm，功率6W;酶底物法定义：在选择培养基上能产生β-半乳糖苷酶分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，并能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光，以此技术来检测大肠埃希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。 培养基：ONPG-MUG 结果判定：水样变黄色同时在366nm的紫外光下产生蓝色荧光为阳性。水样未变黄色而有蓝色荧光产生不能判定为阳性。;五、贾第鞭毛虫子和隐孢子虫 贾第鞭毛虫和隐孢子虫是一类寄生于人和动物体内的肠道原虫，可致人兽共患病。患此病的人和动物从粪便中排出大量的卵(孢)囊污染环境，在地面水和防护差的地下水及处理不良的自来水中都可检出卵(孢)囊。随着社会发展，优质供水势在必行。对一些潜在的危险因素加以限制很有必要。在此基础上，新标准中增加了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测方法。;Cryptosporidium 隐孢子虫 特点:单一细胞原生动物，约3-7?m 。有微小隐孢子虫、 鼠隐孢子虫和贝氏隐孢子虫三种，寄生于人、牛等体内的主要为微小隐孢子虫（C．parvum）。 宿主：人类、鸟类、鼠类、爬行类、鱼类 感染源:隐孢子虫主要寄生在被感染的动物体肠道内，卵囊通过粪便排出体外污染环境。 易感人群：免疫缺陷者（如爱滋患者）、儿童、老人、医务人员等 传播方式:以粪-口，手-口途径为主，污染的水源和空气均可传播。 ;Cryptosporidium 隐孢子虫生活周期;Cryptosporidium 隐孢子虫(染色后荧光显微镜下); ;重要的动物宿主 贾第鞭毛虫在自然界广泛存在，包括两栖动物；鸟类；哺乳动物在内的40多种动物均可成为贾第鞭毛虫的宿主。 调查表明，人排出孢囊可使狗、海狸、麝鼠、沙土鼠及大鼠等动物感染。 一些生活在水中的动物可被来源于人的贾第鞭毛虫孢囊感染，因此这些动物即使不是主要宿主也可能作为贾第鞭虫的传播媒介。 ;;两虫感染的特点 贾第氏鞭毛虫(Giardia)/隐孢子虫(Cryptosporidium) / 感染后无特殊临床症状,无预防疫苗，绝大多数抗生素无效，治疗依赖于自身抵抗力 大部份作为源水的江河及水库水等地表水是高危的,大部分地下水都有被地表水污染的潜在危险 可以通过被污染的源水而进入供水系统,水源性感染已成为最大的感染源，但孢/卵囊对传统的水处理法中氯化消毒有抗性,氯不能渗透过卵囊，沙滤及膜过滤法也不能完全去除 饮用水高温煮沸也并非有效 对氯消毒耐受、对热敏感、感染剂