蚕沙中叶绿素的提取及叶绿素铜钠的制备.docVIP

蚕沙中叶绿素的提取及叶绿素铜钠的制备 张我天，蒋昌林 生物与化学工程系化工081班 指导老师：吴洪达 一 实验目的 1 从蚕沙中提取叶绿素。 2 研究叶绿素合成叶绿素铜钠的工艺条件。 3 分析叶绿素铜钠产品的纯度并计算其产率。 4 通过实验巩固各种相关操作，提高综合能力。 二 实验原理 叶绿素及叶绿素铜钠是重要的绿色素，叶绿素铜钠具有色泽亮丽、性质稳定、使用安全等特点，广泛应用于食品添加剂、化妆品添加剂、着色剂，光电转换材料等领域．也广泛应用于医药保健方面，是生产治疗肝炎、胃及十二指肠溃疡药物的重要原料。而叶绿素广泛存在于绿色植物体内， 尤其是经蚕消化吸收后的粪便一一蚕沙中。叶绿素属卟啉类化台物，水溶性差， 而叶绿素铜钠易溶于水， 所以在日用品、食品和医药中通常是使用叶绿素铜钠盐。 叶绿素的分子式如下： 叶绿素的结构 由于叶绿素易溶于乙醚、苯、丙酮、乙醇的脂性溶剂，故可用乙醇、丙酮混合液来提取。所得的叶绿素由于遇热、光、酸、碱等易分解，且又不溶于水。110度左右会分解，故把叶绿素制备成叶绿素铜钠，其性质更稳定溶解性也会有所提高。 叶绿素分子中的镁原子和四个吡咯上的氮原子相结合，环上是双羧酸的酯，故可以发生皂化反应生成钠盐： C55H72MgN4O5 + 2 NaOH C34H30O5N4MgNa2 + CH3OH + C20H39OH 在酸性介质中，叶绿素钠盐分子中的镁极易被氢原子取代生成褐色的叶绿素酸： C34H30O5N4MgNa2 + 4H+ C34H34O5N4 + 2Mg+ + 2Na+ 叶绿素酸可与铜盐加热条件下生成叶绿素铜酸析出，将叶绿素铜酸溶于丙酮，再与碱反应就生成叶绿素铜钠盐： C34H34O5N4 + Cu2+ C34H34O5N4Cu + 2 H+ C34H34O5N4Cu + 2 NaOH C34H34O5N4CuNa2 + 2 H2O 将所得产品配成1%的水溶液，测定其PH值，根据PH值判定产品是否含有杂质。（PH正常范围为9-10.5） 利用物质对光的吸收具有选择性，同一种物质对不同波长的光的吸收程度不同，同一物质不同浓度对光的吸光度也不同，可以通过测定产品的吸光度，做出吸收曲线，计算405nm和603nm处的吸光比： 吸光比= （吸光比A405nm/A630nm为3.2～4.0为宜） 配置不同浓度的标准叶绿素铜钠盐溶液，在405nm波长处测定它们的吸光值A，用吸光度Ａ对浓度作标准曲线， 根据标准曲线求出405nm时的吸光度Ａ0，从而计算产品的纯度： η＝A405nm/A0×100% 进而得出叶绿素铜钠的得率。 三 实验仪器及试剂 主要仪器：250ml烧杯3个，50ml烧杯3个，1000ml分液漏斗，100ml量筒一个，100ml容量瓶10个，500ml容量瓶一个，1ml移液管一支，5ml移液管1支，，旋转蒸发器，pH试纸，滤纸，温度计（0～100℃），721分光光度计，酸度计，电子天平，水浴锅，玻璃棒，真空泵，蒸馏装置，红外灯及烘箱 主要试剂：蚕沙，丙酮，5％氢氧化钠乙醇溶液，石油醚，95％ 乙醇，40 ％乙醇，lO ％的硫酸铜（CuSO4溶于乙醇中），浓HCl，磷酸二氢钠，三水合乙酸钠。 四 实验装置图 五 实验步骤 1 提取叶绿素 称取50.0g干蚕砂， 置于250ml蒸馏烧瓶中，再加入95％乙醇150ml，水浴加热（在60℃左右）回流提取3小时（注意：温度不能超过80℃，否则叶绿素会分解），过滤，滤渣用150ml 95％乙醇再提取1次。合并2次提取液，旋转蒸发收集过量的乙醇（蒸馏乙醇温度最好在40℃），趁热倒出蒸馏烧瓶中液体，冷却至室温后即成墨绿色膏状物， 此物即为叶绿素粗品。 2 皂化 将上述叶绿素粗品投入250mL烧瓶内，加入5％ 的氢氧化钠乙醇溶液调PH到11（用PH计测定），在60℃下反应1h，（注：意温度不能超过80℃否则叶绿素会分解），冷却后加入1/2体积的石油醚，充分搅拌，然后静置分层，下层皂化液用等量的95％乙醇再充分洗涤1次，而水层用等量的石油醚萃取一次，合并两次萃取所得水层待用，将萃取物倒入烧杯中。（注：皂化过程要耗碱，需控制PH值） 3 酸铜代 用稀HCI将溶液pH调到7（PH计应事先用磷酸盐标准缓冲溶液定位），加入过量2O%的5%硫酸铜乙醇溶液（将1.5gCu溶于乙醇中），再用稀HCl调pH到2（PH计应事先用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液定位），在6O℃下反应1小时，待冷却后加3至4倍体积的蒸馏水，沉降4小时以上，过滤，乙醇