乌司他丁对心肺复苏后Wistar鼠大脑皮层炎症反应影响.docVIP

乌司他丁对心肺复苏后Wistar鼠大脑皮层炎症反应的影响 　　DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.01.010 　　基金项目：国家自然科学基金;广东省科技计划项目（2012B061700074）;2013中山大学国家级大学生创新实验项目 　　作者单位：510080 广州，中山大学附属第一医院急诊科（崔喜梅、夏金明、胡春林、李欣、禹移、荆小莉）; 中山大学附属第三医院肾内科（熊海霞）; 杭州师范大学附属医院急诊科（夏金明） 　　通信作者：荆小莉，Email： jing-xl@163.com 　　【摘要】目的 评价乌司他丁（UTI）对心肺复苏（CPR）后大鼠大脑皮层炎症因子TNF-α和IL-6表达及神经元细胞凋亡的影响。方法 36只成年雄性Wistar 大鼠采用交流电致颤的方式诱发室颤（VF），持续7 min后进行CPR，建立VF/CPR模型。自主循环恢复（ROSC）后立即给予乌司他丁100 000 U/kg或等体积的PBS静脉注射。VF前和ROSC后2、4、8 h采血检测血浆TNF-α、IL-6水平，并取大脑皮层进行定量PCR和Western blot 检测TNF-α、IL-6 mRNA表达和蛋白表达，检测核因子NF-κB p65的核浆转位情况。ROSC 后72 h行皮层NISSL和TUNEL染色计数顶叶皮层存活神经元细胞数和凋亡神经元细胞数。结果 ROSC后UTI组2、4、8 h血浆TNF-α质量浓度分别为（17.7±1.4）、（21.9±2.1）和（17.1±0.6），低于PBS组（t2 h=1.42， t4 h=2.93， t8 h=4.22， 各组Plt;0.05）。UTI组2、4、8 h血浆IL-6质量浓度（ng/mL）分别为（208.9 ±14.1）、（281.5±25.9）和（251.8±15.3），显著低于PBS组（t2h=3.87， t4h=2.45， t8h=3.74， 各组Plt;0.05）。 ROSC后UTI组2、4、8 h大脑皮层TNF-α 、IL-6 mRNA表达和蛋白表达量均显著低于PBS组。PBS组ROSC后2、4、8 h大脑皮层NF-κB p65 的核/浆转换率为（1.08±0.08）、（1.02±0.05）和（0.97±0.02），高于UTI组。ROSC后72 h UTI组大脑皮层存活神经元细胞数为（22±3）个/400×400像素，多于PBS组的（19±2）个/400×400像素（Z=2.887，P=0.02）;凋亡细胞数UTI组为（10±2）个/400×400像素，低于PBS组的（13±3）个/400×400像素（Z=3.751 P=0.01）。结论 UTI降低ROSC后Wistar大鼠全身炎症反应，减少大脑皮层NF-κB通路的激活，减少致炎因子TNF-α和IL-6的表达，从而减少神经元细胞凋亡，促进细胞存活。 　　【关键词】心肺复苏;乌司他丁;炎症反应;皮层;Wistar大鼠 　　The effects of Ulinastatin on the inflammatory response in cerebral cortex of Wistar rats after cardiopulmonary resuscitation 　　Cui Ximei*， Xiong Haixia， Xia Jingming， Hu Chunlin， Li Xin，Yu Yi， Jing Xiaoli.*Emergency Department of the First Affiliated Hospital of Sun Yat-Sen University， Guangzhou 510080， China 　　Corresponding author： Jing Xiaoli，Email： jing-xl@163.com 　　【Abstract】Objective To evaluate the effects of Ulinastatin （UTI） on the expressions of TNF-α， IL-6 and neurons apoptosis in cerebral cortex of rats after cardiopulmonary resuscitation （CPR）.Methods Thirty-six healthy male adult Wistar rats were induced ventricular fibrillation untreated for 7 min and then received CPR. The animals were infused UTI 1