细胞生物电活动.doc

细胞的生物电现象 一、电生理学实验常用仪器 （一）刺激系统 1.电子刺激器： 刺激与反应是观察机体组织兴奋性的重要指标。1）单刺激2）双刺激3）连续刺激 2.刺激隔离器：其用途是消除地环干扰，避免伪迹和误差。 由于刺激输出的一端为地，因此，在记录生物电时接通到组织去的电刺激必须和地面进行隔离 。如不进行隔离，将使交流电波或刺激伪迹带入记录系统，导致生物电波形被完全掩盖。 3.刺激电极：刺激电极是刺激系统不可缺少的重要组成部分，较为常用的有普通电极、保护电极和乏极化电极。 1）普通电极：常用于刺激离体组织的急性实验，不适于慢性实验。因为在电流作用下，离子进入组织可产生毒性作用。 2）保护电极： 当实验需要刺激深部组织时，采用保护电极，可避免刺激周围无关组 织，保证刺激的准确性。 3）乏极化电极：当采用直流电刺激组织时，金属电极与组织之间发生电解过程，产生与刺激电流相反的电动势，这种反电动势即形成了极化电流，对抗了原来的刺激电流，使刺激电流的强度衰减，刺激的时间越长，失真现象越严重。采用乏极化电极，则可避免极化现象。常用的乏极化电极有银-氯化银（Ag-AgCl），甘汞电极（汞-氯化汞电极）等。 (二）信号探测转换系统 信号探测转换系统由信号引导电极和传感器（换能器）组成。其功能是拾取生物信号，并进而把非电生物信号转换为生物电信号。 1. 测量和信号引导电极 （1）普通电极：其电极尖端一般是毫米级的，作为记录用的普通电极，又称为记录电极或引导电极。 (2) 微电极：电极尖端是微米级的，根据制作材料不同，可分为金属微电极、碳丝微电极和玻璃微电极。 玻璃微电极：分为单管和多管。单管：一般尖端外径4μm ，如用于细胞内记录尖端外径1μm。单管微电极的粗端插入银-氯化银电极作为导电连接，由于电极内径小，电极阻抗高，一般选用3mol/L的KCL溶液充灌玻璃微电极以减少电极阻抗。多管微电极：可以引导细胞的生物电活动，同时可以通过微电泳法向被观察的细胞的临近小范围内导入离子化合物，药物、及对照等。 2. 传感器 传感器由敏感元件和转换元件组成。是一种能把机体生理活动的非电信号转换成与之有特殊关系的电信号的转换装置。 分类：1）物理型传感器：电阻式、电感式、光电式等。 2）化学型传感器：能把化学成分和浓度等转换成与之有确定关系的电信号的传感器。 3）生物型传感器：压力换能器，张力换能器 （三）信号调节系统 1.前置放大器2.微电极放大器 （四）显示、记录系统 二、细胞兴奋性和生物电现象 （一）兴奋性：是生命的基本特征之一。 组织细胞受到刺激时，可以应答性地出现一些特定的反应或暂时性的功能改变。 1. 兴奋性的概念：各种组织兴奋性的高低不一样---可兴奋组织？兴奋性和动作电位有联系吗？ 2. 兴奋和抑制 3.兴奋和动作电位： 4.兴奋性和动作电位 （二）生物电现象：细胞水平的生物电现象主要有两种表现形式，一是在安静时的静息电位和受到刺激时的动作电位。 1.细胞的跨膜静息电位 绝大多数动物细胞的静息电位都表现为膜内较膜外为负。通常规定膜外电位为零。则膜内电位大都在-10~-100mV之间。 （1）静息电位(resting potential RP) 1）概念：细胞处于相对安静状态时，细胞膜内外存在的电位差。 2）证明RP的实验： （甲）当A、B电极都位于细胞膜外，无电位改变，证明膜外无电位差。 （乙）当A电极位于细胞膜外，B电极插入膜内时，有电位改变，证明膜内、外间有电位差。 （丙）当A、B电极都位于细胞膜内，无电位改变，证明膜内无电位差。 例如高等动物的神经和肌肉细胞息电位值为-70～-90mV，平滑肌细胞约-55m。人的红细胞静息电位值约为-10mV。静息电位在大多数细胞是一种稳定、分布均匀的直流电位（一些有自律性的心肌细胞和胃肠平滑肌细胞例外），只要细胞未受到外来刺激而且保持正常的新陈代谢，静息电位就稳定在某一相对恒定水平。 记录静息电位时，要将一个电极插入细胞内，因此这种记录方式也称细胞内电位记录。目前在实验中使用的通常是玻璃微电极，它是将毛细玻璃管加热拉制而成，其尖端通常小于0.5微米，玻璃管内充以KCI溶液，由于这种电极只有尖端导电，而且尖端很细，因此可以将它直接刺入离体或再体的细胞内，记录细胞内电位。 为了说明静息电位的存在和可能出现的变化，人们使用了一些单纯描述两侧电荷分布状态的术语。例如静息电位存在时膜两侧的内负外正状态称为膜的极化状态（polarization），当静息时膜电位向负值加大（膜电位增大）的方向变化时，称为膜的超极化（hyperpolarization）；相反，如果膜电位向负值减少（膜电位减小）的方向变化，称为