广西香蕉枯萎病菌4号生理小种对桂蕉6号的致病力分化研究.docVIP

广西香蕉枯萎病菌4号生理小种对桂蕉6号的致病力分化研究 　　摘要：桂蕉6号是广西的主栽香蕉品种，占全区香蕉种植面积的90%以上。为了明确广西香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp.cubense）4号生理小种对桂蕉6号的致病力，通过采集分离，获得41个香蕉枯萎病菌4号生理小种菌株，用伤根淋灌法接种香蕉组培苗。根据病菌对桂蕉6号的致病力强弱，上述菌株可以分为3类，其中强致病力菌株22个，中致病力菌株7个，弱致病力菌株12个，分别占供试菌株的53.66%、17.07%、29.27%。由此可见，广西香蕉枯萎病菌4号生理小种存在明显的致病力分化现象，强致病力菌株为优势种群。 　　关键词：香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. cubense）；4号生理小种；致病力分化；桂蕉6号 　　中图分类号：S432.4+4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2796-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.020 　　由尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp. cubense）侵染引起的香蕉枯萎病是目前世界香蕉生产上的毁灭性病害。香蕉感病后，一般在抽穗期或者结实后开始表现症状，病株先在下部叶片的叶缘出现特征性的黄色，黄色病变逐渐向主脉扩展，变黄叶片迅速萎蔫，叶柄在靠近叶鞘处折曲下来，在短时间内，其他叶片相继变黄、变褐，干枯倒垂在假茎的四周，有的病株未到果实成熟即已枯死，有些病株虽不枯死，但果实发育不良，果梳少，果指小，无食用价值。病菌可以通过蕉苗、土壤、流水和农具传播，具有很强的传染性，一旦扩散蔓延则难以控制。 　　由4号小种侵染引起的香蕉枯萎病在中国内地已开始流行，在广东、福建、海南和云南省均有该病严重发生的报道[1]，许多发生严重的蕉园减产50%以上，以致大量海南和广东的香蕉园老板转移到广西继续香蕉种植开发。2007年11月，广西植保总站首次确认香蕉枯萎病疫情，相关农业部门对此已采取相应的检疫防控措施，但未达到彻底有效的控制[2]。随后，部分蕉园内开始出现小面积的香蕉枯萎病植株，呈团块状零星分布[3]，之后几年不断蔓延扩散，目前在广西武鸣县、隆安县、浦北县和南宁市西乡塘区等主要蕉区已呈暴发状态，不少蕉园因该病严重发生，被迫丢荒，给蕉农带来巨大的损失，同时也给蓬勃发展的广西香蕉产业带来沉重打击。 　　无论是生物防治、化学防治，还是农业防治，效果均不理想，大量的调查和研究证实，选育和种植抗病品种是控制香蕉枯萎最经济有效的措施[4]。现已选育出一些抗病、耐病品种，如GCTCV119、抗枯5号和农科1号等，但仍未获得十分理想的效果，其中的原因与病原菌的变异和分化有着密切关系[5]。因此，研究田间病菌不同菌株间对香蕉主栽品种桂蕉6号的致病力分化，强弱致病力菌株在各蕉区的分布情况，可以掌握广西田间香蕉枯萎病菌种群构成，为植物检疫、香蕉苗的调运和香蕉抗病育种提供直接的理论依据和技术支撑，对香蕉枯萎病的防治及香蕉产业发展具有重要意义。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　供试香蕉品种选用桂蕉6号，香蕉组培苗由广西植物组培苗有限公司提供。该品种在海南、四川占全省香蕉种植面积的60%～70%，在广东和云南达90%，在广西则高达95%[6]。 　　1.2 方法 　　1.2.1 病害调查及标本采集 以广西武鸣县、隆安县和南宁市西乡塘区等地的香蕉园为调查对象，采取踏查、普查和定点调查等方法进行调查，并采集病样标本。 　　1.2.2 病原菌的分离 将病害标本经表面清洗后，采用常规组织分离方法分离，取病健交界处的香蕉茎块，经75%乙醇消毒30 s，0.1%升汞消毒150 s，无菌水冲洗3次后，置于PDA培养基培养10 d，待病菌菌落产生分生孢子，挑取少许，在显微镜下观察其大型分生孢子和小型分生孢子，挑取经鉴定的香蕉枯萎病菌株PDA培养基上培养约7～10 d，待菌落产生分生孢子后，用移液器吸取适量无菌水，加入培养基中混匀，制成分生孢子悬浮液并用无菌水调整到合适的浓度。在超净工作台中，用直径4 mm的打孔器在水琼培养基（水琼脂19 g，无菌水1 000 mL）打孔。用灭菌毛细管吸取分生孢子悬浮液，轻轻点于打好孔的琼脂块上，置于显微镜下逐块检查，选取仅有单个分生孢子的培养基小块，移置到PDA培养基上培养10 d，置于冰箱保存备用。 　　1.2.3 致病性测定方法 将冰箱中低温保存的香蕉枯萎病菌，移置到PDA培养基上，于（28±1） ℃的恒温培养箱中培养，7 d后用无菌水制成2×106个/mL的孢子悬浮液[7]。 　　待香蕉苗长到6～8叶时，采用盆栽伤根淋菌法，接种香蕉枯萎病菌的分