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医学检测中微流控芯片应用 　　【摘要】医学检验是对病人的血液、体液、分泌物或脱落细胞等标本，进行化验检查，以获得病原、病理变化及脏器功能状态等资料。医学检验分为临床检验与医学实验技术两方面。 　　【关键词】医学检验；化验；临床检验 　　 　　引言 　　 　　检验医学是社会主义现代化建设所需要的、具备基础医学、临床医学、检验医学等方面的基本理论、基本知识和基本技能，知识面宽、能力强，素质高，能在各级医院、血站及防疫等部门从事医学检验及医学类实验室工作的检验医师。 　　医学检验是对病人的血液、体液、分泌物或脱落细胞等标本，进行化验检查，以获得病原、病理变化及脏器功能状态等资料。医学检验分为临床检验与医学实验技术两方面。临床检验是临床医生确诊的必要手段之一，而医学实验技术主要侧重于实验操作方面，为研究所、实验室输送实验师（技师）。 　　 　　1微流控芯片概述 　　 　　微流控芯片(Microfluidic)，又称芯片实验室(Lab on a Chip)或者微全分析系统(MicroTotal Analysis Systems，μ-TAS)[1]，就是通过分析化学、微机电加工(MEMS)、计算机、电子学、材料科学及生物学、医学的交叉实现从试样处理到检测的整体微型化、自动化、集成化与便携化[2]。这样通常需要在一个实验室中进行的实验可以在一块芯片系统上进行，大大提高了实验速度，减少了所需的样本剂量，节省了昂贵的化学试剂，降低了化学污染。它充分体现了当今分析设备微型化、集成化与便携化的发展趋势。目前，微流控芯片主要应用于单核苷酸多样性检测、基因诊断、蛋白质分析等前沿技术领域。 　　微流控分析芯片是通过微细加工技术将微管道、泵、微阀、微储液器、微电极、微检测元件、窗口和连接器等功能元器件，像集成电路一样集成在芯片材料上[3]。制作方法在传统的光刻和刻蚀的基础上发展模塑法、热压法、激光切蚀法、LIGA技术和软光刻方法[4]。 　　 　　2微流控芯片在医学检测中的应用 　　 　　2.1 离子检测 　　离子分析在环境科学、生命科学以及食品工业等许多领域中都有重要的用途。临床医学中也少不了对各种离子的检测，如血液分析、培养液监测。经过近年的发展，微流控芯片技术在离子分析领域取得了很多研究成果。 　　金属离子虽然在体内含量很低，但却对生命活动起着举足轻重的影响。如K+、Na+、Ca+等调控着重要的离子通道，Fe+、Zn+等是金属酶的重要配体。等速电泳(ITP)是利用离子的有效电泳淌度的不同，对离子化合物进行定性和定量分析以及样品的浓缩。Prest等在硅胶芯片上利用ITP技术，通过电导检测实现了对K+、Na+的分离分析。荧光检测是微流控芯片中应用最广泛的检测手段，金属离子通常不含有荧光基团，需要经过衍生后才能进行荧光检测分析。Yang等根据三磷酸腺昔(ATP)与钙吸收反应的关系(ATP调控Ca+通道的开、关)，在微流控芯片上研究了ATP浓度改变时Ca+浓度的变化。先用自身无荧光的荧光试剂Fluro3对细胞进行标记，Fluro3在胞内酶的作用下与Ca+结合，激光扫描被标记的细胞即可获得Fluro3-Ca+发出的荧光信号。当具有梯度浓度的ATP溶液流过贴壁细胞，引起胞内钙离子浓度的变化，用共焦激光扫描显微镜可以检测荧光信号的变化。Wheeler等在微流控芯片上进行了细胞内的Ca+离子流量实验，将衍生试剂、刺激剂相继灌注到微室中，细胞在受到刺激后释放出被荧光标记的Ca+，然后进行激光诱导荧光(LIF)检测。 　　一氧化氮(NO)作为一种重要的生物信使分子，在血流调节、信号传导、免疫防御等多种生理及病理过程中发挥重要的作用。检测NO浓度的对疾病诊断具有重要意义。NO很容易被氧化成NO2ˉ、NO3ˉ，对NO含量的检测多通过检测NO2ˉ、NO3ˉ来获得。Miyado等在微流控电泳芯片上检测了血清和唾液中的NO2ˉ、NO3ˉ，并在8s内完成了两种离子的分离。 　　2.2 代谢物的检测 　　代谢是生命的基本特征。从有生命的单细胞到复杂的人体，都与周围环境不断地进行物质和能量交换，这一交换过程称为代谢或物质代谢。对代谢物的分析，能够帮助人们更好的理解病变过程以及机体内物质的代谢途径。微流控芯片技术为灵活快捷地分析代谢物提供了新的方法，一些代谢物的分离、检测已经在微流控芯片上得到实现。 　　体液中葡萄糖浓度与多种疾病相关，是代谢物检测的重要指标。检测葡萄糖浓度的典型方法就是经葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化为具有电活性的葡萄糖酸和过氧化氢(H202)，然后通过电化学方法进行检测葡萄糖酸或者通过化学发光法检测过氧化氢。即： 　　葡萄糖+氧气葡萄糖氧化酶 H202+葡萄搪酸 　　 这一过程可以方便地在微流控芯片上得到实现。在芯片上，含有