微生物课件-实验-2病原实验细菌的生理a.ppt

实 验 二 细 菌 的 生 理 实验安排 自然界细菌的分布 外界因素对细菌的影响 细菌的分离培养 细菌的代谢产物 自然界细菌的分布： 空气中细菌的检查 鼻腔中细菌的检查 （1） 任意自选物细菌的检查 （2） 手指皮肤消毒前、后细菌的检查 （3、4） Hydrogen sulfide test 煮沸对细菌杀灭作用 目的要求： 认识高温（煮沸法）对细菌繁殖体和芽胞的作用 材料： 1、菌种：枯草杆菌（有芽胞） 大肠杆菌 (无芽胞） 2、肉汤培养基、水浴锅 紫外线杀菌试验 目的要求：了解紫外线的杀菌作用 材料： 1、大肠杆菌培养物 2、普通琼脂平板 3、灭菌的“口”字形黑纸片、镊子、 灭菌棉签、紫外灯 记录高温煮沸法的结果并讨论 记录细菌生化反应结果(表格式) 这种杀灭细菌的繁殖体，不能杀死细菌芽胞的方法叫什么？ ——消毒 再问大家一个问题，高温煮沸能不能杀灭细菌的芽胞？ ——能，只是要适当延长时间！ 介绍 １、原理：利用密闭的蒸气容器灭菌，通常在1.05㎏/cm2的蒸气压力下，容器内温度可达121.3℃，维持15－30分钟，即可达到灭菌的目的。 其中起作用的是温度还是压力？温度！ ２、重要参数： 1.05㎏/cm2 或103.4kPa， 121.3℃， 15－30分钟 ３、适用范围：凡耐高温、耐湿的物品，如手术器械、敷料和一般培养基等，均可用此法灭菌。 ４、意义：灭菌（杀灭芽胞最有效的方法） ５、高压蒸汽灭菌器结构 ６、使用方法及注意事项 合成代谢产物：示教，色素----金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌 分解代谢： 葡萄糖发酵管 硫酸亚铁半固体 蛋白胨水 ⊕ ＋ － 副乙 ＋ － ＋ 史氏 单糖发酵试验，葡萄糖发酵管，含酚红指示剂（原培养基中性略偏碱为淡红色；产酸后为黄色），管内还有一开口朝下、上端封闭的小管，用于收集气体。 硫化氢试验，用的是半固体培养基。黑色沉淀物呈球形，可能是生成物扩散造成。 吲哚试验，蛋白胨水，液体，示教前有老师或学生自己添加几滴吲哚试剂，一为玫瑰红色，另一为淡黄色即原试剂色。 教学生看示教，先找出两两对应的管（大试管中有小管的，液体的，半固体的，共三对） 第10页，黑板上画示意图，示教操作！分组看！ 强调，混摇均匀菌液，再取菌；掌握好划线的力度，腕力，轻快；接种环的烧灼、冷却（否则，菌烫死）；划线的密度适中，太少（8条－－4条，仅相当划半块平板） 原始划线区，划；灼烧、冷却；碰原始划线区，划线，不重复划；灼烧、冷却；平板转九十度，划线，不碰原始区！ 掌握单手拿板的正确姿势！ 菌液不回收！ 要求列表记录！（三条横线的表格格式） 排气管应插入到内锅的排气管中，以保证放气时能把内锅底部的冷空气排出 手提式，还有不同规格，基本构造相似。有的有房间那么大。 浅蓝箭头所指为安全阀；黄箭头所指为排气阀 结束，要排水，防止生锈或长菌。 * * * 细菌的分离培养 目的要求： 掌握细菌的平板划线分离 了解细菌培养的基本条件 材料： 1、菌种：葡萄球菌和大肠杆菌 混合菌液 2、普通琼脂培养基 单糖发酵试验 硫化氢试验 吲哚试验 细菌的生化反应 菌株： 乙型副伤寒杆菌 史氏痢疾杆菌 细菌的合成代谢 色 素 水溶性： 绿 脓 杆 菌 脂溶性： 金黄色葡萄球菌 　外界因素对细菌的影响 物理因素：煮沸对细菌的杀灭作用 高压蒸汽灭菌法 紫外线杀菌试验 化学因素：碘酒、酒精 生物因素：抗生素敏感试验 37℃ 24h 枯草杆菌 枯草杆菌 大肠杆菌 大肠杆菌 100℃ 5min 100℃ 5min 菌膜 澄清 浑浊 普通条件培养下细菌生长状况 枯草杆菌 大肠杆菌 高温煮沸后细菌生长状况 枯草杆菌 大肠杆菌 高压蒸汽灭菌法 原 理 重要参数：1.05kg/cm2或103.4kPa 121.3℃ 15－30分钟 适用范围：耐高温、耐湿的物品 意 义 锅盖 内锅 外锅 作 业 自然界细菌的分布 空气