微生物课件-实验-6实验六其他细菌、病毒学试验.ppt

实验六 其他细菌、真菌、病毒学试验 主要内容 1、上次试验结果观察 2、螺旋体形态观察 3、病毒学试验 4、分枝杆菌与抗酸染色 主要内容 1、上次试验结果观察 2、厌氧培养 3、螺旋体形态观察 4、真菌学、病毒学试验 5、分枝杆菌与抗酸染色 上次试验结果观察 双糖铁基培养基结果观察 乳糖 H2S 葡萄糖 动力 肖氏伤寒杆菌 — + ⊕ + 痢疾杆菌 — — + — 大肠杆菌 + — ⊕ + 厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 1、形态观察 破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 a. 原理：焦性没食子酸在碱性溶液中能迅速吸收氧气，生成深棕色焦性没食子橙，利用此法可除去试管或平皿等容器中的氧气。 （2）疱肉培养基 1、形态特点： 与疾病有关的： 疏螺旋体属 如 伯氏疏螺旋体 密螺旋体属 如 梅毒螺旋体 钩端螺旋体属 如 钩端螺旋体 1、形态: 单细胞—酵母菌 如白假丝酵母菌 新生隐球菌 多细胞—丝状菌 菌落特征: 酵母型菌落 类酵母型菌落 丝状型菌落 病毒感染细胞后，在胞浆或胞核内出现嗜酸或嗜碱性的圆形、椭圆形、不规则形斑块结构。 分枝杆菌与抗酸染色 1、 形态 2、结构特点 3、抗酸染色 结构特点 细胞壁含有大量脂质，主要是分枝菌酸 ，一般不易着色，如果经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，所以又称抗酸杆菌。 抗酸染色 （1）温染：石炭酸复红溶液 5 min （2）脱色：3%盐酸酒精溶液 0.5-1 min （3）复染：碱性美兰 溶液 0.5 min 抗酸染色 （1）温染：石炭酸复红---1液 5 min （2）脱色：3%盐酸酒精---2液 0.5-1 min （3）复染：碱性美兰---3液 0.5 min 结核杆菌（抗酸染色） 示教 1、镜下： 破伤风梭菌 梅毒螺旋体 病毒包涵体 白假丝酵母菌 上次实验结果观察 操作 示教，梅毒螺旋体，先天梅毒胎儿肝脏组织切片，镀银染色，银盐沉积，因此看不出螺旋样结构，只可看到染成棕黑色、细杆状结构，其它组织一般染成棕褐色 暗视野映光法 螺旋细密较规则，8－14个螺旋，两端尖直 暗视野映光法 3－10个，螺旋稀疏而不规则， 微量生化反应小管，葡－由蓝紫变黄（＋），靛－添加吲哚试剂变红（＋），硫－黑色沉淀（＋） 双糖铁基培养基，观察乳糖发酵试验时，应提醒观察上层上端，但有时学生上层接种菌量少且较集中于上层下端因此有时即使阳性上层上端也不变色，故分析时要综合判断。（若葡萄糖发酵试验产酸产气，基本可判断为大肠埃希菌） 微生物根据其结构特点，可分为三大类。原核型微生物－－二菌四体！ 示教，嗜酸性包涵体 包涵体，一般只作为病毒感染的辅助诊断，因为包涵体不是病毒感染特有的 ，当正常细胞经超声处理后在光镜下观察，有时也可看到包涵体。但狂犬病病毒包涵体（内基小体），可作为诊断依据，大脑海马回椎体细胞内，特异。 示教，巨细胞病毒包涵体，胞浆 麻疹病毒包涵体，胞浆和胞核都可有 二病毒包涵体均为嗜酸性，均一的红色斑块 细长，直或略弯曲，有分枝的倾向，常聚集分布 盐酸酒精，比95％的乙醇更强的脱色剂 细菌为卡介苗，无传染性 涂片，学生自己操作。（标记，画区，涂片，干燥，固定） 温染时间计算，加热冒烟开始算时间，若中间液体快干需添