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国际饮用水安全评价及致突变性检测方法研究进展

国际饮用水安全评价及致突变性检测方法研究进展   【摘 要】饮用水的安全已成为影响人类生命安全和健康的重要因素,本文着重介绍目前国际饮用水安全评价体系的主要关注点,及安全评价体系所关注的一个重要方向――致突变性的检测技术目前的研究进展。   【关键词】Ames试验;致突变性;饮用水;标准体系   前言   日益发展的工业在不断提升人们生活水平的同时,也迫使人们不得不面对日益严峻的水污染问题[1]。饮用不安全水导致的各种消化类、传染类疾病不断侵蚀着人类的健康,使人类生活质量大打折扣。目前,饮用水对人体的主要危害主要包括三大类:一、可能导致传染病传播和流行;二、可能诱发癌变、基因突变等;三、可能引起人类出现各种急、慢性中毒甚至畸变等远期危害。其中,物质的致癌性和致突变性之间关联度高,因此,通过加强对饮用水污染无致突变性的安全评价,对于预防人类癌症,意义重大。[2]   1.国际饮用水安全评价体系   1.1 WHO《饮用水水质准则》   WHO《饮用水水质准则》迄今共三版,(1983~1984年、1993~1997年、2004年版),   并于2006年进行增补。其内容包括了微生物指标、具健康意义的化学指标和放射性指标等。   1.2 EC《饮用水水质指令》   迄今为止,欧洲共同体共发布了两版《饮用水水质指令》,时间分别为1980年和1998年。相较而言,98版有两大特点:一、更强调标准值的科学性;二、更加强调与WHO《饮用水水质准则》限定准则值的统一性。由于要考兼顾不同发展水平、不同时期加入、不同气候环境地理情况的众成员国的要求,EC《饮用水水质指令》既设置了基本的微生物、毒性、感官和理化指标,有采取对指标的限制相对较宽松及灵活的规定,其成员国可针对国内实际情况综合考虑,在其基础上增加相应的指标数,同时设定适合自身的浊度和色度指标数值。   1.3 USEPA《国家饮用水水质标准》   由美国环保局EPA最早于1914年颁布了《公共卫生署饮用水水质标准》,及至1962年共经历了四次修订;1974年,《安全饮用水法》获国会通过,之后,EPA于1975年发布《饮用水一级规程》(强制性),以及于四年后发布《饮用水二级规程》(非强制性)。饮用水标准及至2006年共进行了四次修订。现行标准将有机物、无机物、微生物和放射性指标(合共98项)列入强制指标,将感官及容貌影响指标(合共15项)列为非强制性指标。   2.致突变性检测技术的研究进展   2.1 Ames试验法   目前,国际通用的体外致突变性检测使用的常规方法是细菌基因突变――Ames试验法。主要是用于检测碱基突变导致遗传毒性的传统方法,其基本原理是利用鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphymurium)组氨酸缺陷型突变菌株(His-)回复突变性对致突变物质进行检测。正常情况下,His-菌株因无法合成组氨酸而无法在不含His的培养基上生长,然而,当受到致突变性物质的作用(部分反应需要在肝微粒体酶系作用下),His-菌株发生回复突变,成为野生菌株,重新具备合成His的能力,即使在缺乏His的培养基上也可生长。通过受试物对His-菌株的回复突变的作用影响,计数每个平皿的回变菌落数,可得出受试物的致突变性。   实验选用鼠伤寒沙门氏菌TA98(移码突变型)、TA100(碱基置换突变型)、TA102(对醛、过氧化物及DNA交联剂较敏感)菌株,经R因子、回复突变数、菌株鉴定后进行试验。针对不同的菌株,使用不同的诱变剂。叶虹、郑卫东等[3]使用1,8-二羟基蒽醌50~100 μg作为TA102 的诱变剂,发现其对TA102有明显诱变性,呈明显的剂量-反应关系,且对于加或不加S9,对结果无明显影响。张青碧等[4]使用TNO ( 阳性对照剂量2μg/ml ) 和叠氮化钠( 阳性对照剂量15μg/ml )分别作为TA98、TA100的阳性对照剂检测当地饮用水的致突变性作用;   2.2 改良方法简介   Ames试验是常用的传统检测方法,已获得国际普遍认可,但由于其对于含组氨酸成分的检测物质会呈现假阳性。因此,并不适用于部分特定的食品及化妆品。针对该问题,研究人员作了相应的方法改良,其中包括:1.着重通过预处理样品[5]等,如Aeschbache[5]使用抽提法,通过去除易致使试验结果呈现假阳性的组氨酸等以达到上述要求;2.使用其他菌种进行试验,使试验结果避免受到上述原因的影响[6];3.波动实验,操作较繁复,不易推广;4.使用原有菌株的突变频率进行检验判定试验结果,该方法因机理未甚明确而难以推广;5金建玲等运用修正的Ames方法,通过增设哺乳动物骨髓细胞染色体畸变实验以及组氨酸阴性对照,排除了试验中的假阳性结果[6]。另外,还有研究人员分析了其他的检

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