喜树内生真菌DiaporthespXZ07中2个新内酯及其抑制肿瘤活性研究.docVIP

喜树内生真菌DiaporthespXZ07中2个新内酯及其抑制肿瘤活性研究 　　[摘要]对1株喜树内生真菌Diaporthe sp XZ07的次生代谢产物进行研究。采用RP18，Sephadex LH20，硅胶等材料进行色谱柱分离纯化得到2个新化合物，鉴定为5（（E）1，4，5trihydroxyhex2enyl）furan2（5H）one（1）和（5Z）5（2，3，4，5tetrahydroxyhexylidene）furan2（5H）one（2）。用MTT法测试化合物活性，结果显示化合物1对Hela有较强抑制活性，化合物2对MCF7，SHSY5Y，3LL均有较强抑制活性。 　　[关键词]喜树；内生真菌；Diaporthe sp；内酯；抗肿瘤活性 　　[Abstract]To study the secondary metabolites and their cytotoxic activities of an endophytic fungus Diaporthe sp XZ07cultivated on Camptotheca acuminata Colum chromatography by RP18， Sephadex LH20 and silica gel was used to isolate and purify the chemical constituent Two new compounds were isolatedand identified as 5（（E）1，4，5trihydroxyhex2enyl）furan2（5H）one（1）and（5Z）5（2，3，4，5tetrahydroxyhexylidene）furan2（5H）one（2）by spectroscopic analysis Cytotoxic activities were evaluated by MTT method Compound 1 showed strong inhibitory activity against Human cervical carcinoma cell line Hela， and compound 2 showed strong inhibitory activity against breast cancer cell line MCF7， Human neuroblastoma SHSY5Y and Lewis lung carcinoma cells 3LL 　　[Key words]Camptotheca acuminata； endophytic fungus； Diaporthe sp.； lactone； cytotoxic activities 　　doi：10.4268/cjcm 　　植物内生菌与其宿主植物互利共生的关系，使植物为其内生真菌提供生存环境和必需的营养物质的同时，内生菌则产生丰富多样的有生物活性的次生代谢产物，使其宿主比未感染植株具有生长快速、抗逆境和抗病害等优势。这些次生代谢产物在药物开发、生物防治和固氮方面中具有重要的应用潜力[14]。 　　在对喜树Camptotheca acuminata内生菌研究过程中，本实验室发现多株具有抗肿瘤活性的内生真菌[5]。其中菌株Diaporthe sp XZ07对肿瘤细胞Hela具有很强的抑制活性。而在前期研究中并未发现活性很强的化合物[6]。本文报道从该菌中分离得到的2个新的内酯衍生物，分别鉴定为5（（E）1，4，5trihydroxyhex2enyl）furan2（5H）one（1）和（5Z）5（2，3，4，5tetrahydroxyhexylidene）furan2（5H）one（2）。并对化合物1和2进行了抑制宫颈癌细胞Hela、乳腺癌细胞MCF7、人神经母细胞瘤SHSY5Y和Lewis肺癌细胞3LL的活性筛选。 　　1材料 　　Bruker AM400型核磁共振仪，VG AutoSpec3000质谱仪。薄层色谱用硅胶GF254（青岛海洋化工厂）；柱色谱材料：硅胶（200～300 目）及硅胶H（青岛海洋化工厂）、Sephadex LH20（Pharmacia 公司）和反相硅胶RP18（Merck 公司）。 　　Diaporthe sp XZ07的GenBank系列号为DQ272498，分离自药用植物喜树Cacuminata的枝条，现保存于中国科学院昆明植物研究所。 　　2提取与分离 　　将菌株XZ07用GPY液体培养基液体发酵15 L（包含蛋白胨 2 g?L-1，酵母提取物 05 g?L-1和葡萄糖 10 g?L-1；pH 70），28 ℃培养2 d，将该培养物转接到发酵罐中