地塞米松对实验性蛛网膜下腔出血脑脊液中TGFβ1和软脑膜厚度影响.docVIP

地塞米松对实验性蛛网膜下腔出血脑脊液中TGFβ1和软脑膜厚度影响 　　[摘要] 目的 探讨不同途径早期给予地塞米松对TGF-β1浓度和软脑膜纤维平均厚度的影响。 方法 通过枕大池给自体血建立蛛网膜下腔出血模型，腹腔组及鞘内组分别给予地塞米松。第20天时用ELISA法测脑脊液TGF-β1浓度，用图像分析系统测软脑膜纤维平均厚度。 结果 对照组中TGF-β1浓度及软脑膜纤维平均厚度明显高于腹腔给药组和鞘内给药组；腹腔给药组TGF-β1浓度及软脑膜纤维平均厚度明显高于鞘内给药组。 结论 SAH后早期静脉给予大剂量地塞米松有可能对脑积水的发生有一定预防作用。 　　[关键词] TGF-β1；软脑膜纤维平均厚度；地塞米松 　　[中图分类号] R743[文献标识码] A[文章编号] 1673-9701（2012）12-0017-03 　　临床上自发性蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）属于出血性脑血管病比较常见的现象，自发性蛛网膜下腔出血是由于多种原因引起的脑血管破裂，使血液进入蛛网膜下腔所引起的综合征，约占急性脑血管病的15%左右。临床上影响蛛网膜下腔出血预后的主要因素为交通性脑积水及脑血管痉挛等，据报道，SAH继发慢性脑积水的发生率为6%～67%，而其中15.0%～26.3%的患者需行脑室-腹腔分流术[1]。脑积水的发生给患者身心及经济上都带来了二次负担。继发慢性脑积水的发生机制尚不明确。而相关研究表明转化生长因子-β1（TGF-β1）在SAH后脑积水形成中起着重要作用。本实验欲通过不同途径早期给予地塞米松观测其对TGF-β1浓度及软脑膜纤维厚度的影响，进而评定不同途径给予地塞米松对慢性脑积水的预防效果。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物及分组 　　2011年9～11月进行试验，选取由山西医科大学生理实验室提供的2～3月龄，体重250～350 g的雄性Wistar大鼠30只，随机分为3组，每组10只，分别为枕大池给予地塞米松组（鞘内给药组）、腹腔给予地塞米松组（腹腔给药组）、枕大池给予生理盐水对照组（对照组）。在给药后第20天时，分别检测脑脊液中TGF-β1及软脑膜纤维厚度的变化。 　　1.2 标本制备 　　将实验大鼠称重后，用10%的水合氯醛以0.3 mL/100 g给予腹腔注射麻醉，待角膜反射消失后，于后颈部及左侧股动脉区备皮，消毒左侧股动脉区，剪开皮肤剥离股动脉备用。然后将大鼠俯卧头低位，消毒，取枕外隆凸以下正中切口约2.0 cm，钝性分离颈部肌肉显露环枕膜，用1 mL注射器针头刺破环枕膜，有突破感后略推进见有脑脊液流出。迅速抽取股动脉动脉血0.2 mL，推入枕大池。拔针后按压3 min。俯卧头低位约30 min。按不同组别分别给予腹腔注射地塞米松1 mg/100 g，鞘内注射地塞米松0.2 mg/100 g，鞘内注射生理盐水0.2 mg/100 g，缝合切口。待麻醉清醒后入笼。72 h后取右侧股动脉重复上述操作。取样前每日对切口消毒。 　　1.3 标本取材 　　第20天时用10%水合氯醛以0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉，取枕外隆凸以下原切口进入，取脑脊液0.15～0.2 mL以2000 r/min离心20 min，取上清液置于-20 ℃冰箱中待测。迅速将实验大鼠打胸，显露心脏，经左心室插管后，剪开右心耳，用生理盐水冲洗5 min后，灌注10%的甲醛30 min以固定，断头取脑后置于10%的甲醛中固定保存72 h后，石蜡包埋，每份标本经额、顶、枕部冠状以5 μm切片。采用Masson三重染色。用山西医科大学实验室20×10倍光学显微镜下拍片，用图像分析系统测软脑膜纤维平均厚度。用ELISA法测脑脊液TGF-β1浓度。 　　1.4 统计学分析 　　各组数据应用（x±s）表示，采用SPSS 13.0软件包进行统计分析。各组之间的比较采用单因素方差分析，P ＜ 0.05为差异有统计学意义。脑脊液TGF-β1浓度与软脑膜纤维厚度之间关系采用Pearson相关分析法分析。 　　 　　2 结果 　　对照组中TGF-β1浓度与软脑膜纤维平均厚度明显高于腹腔给药组和鞘内给药组，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。腹腔给药组TGF-β1浓度与软脑膜纤维平均厚度明显高于鞘内给药组，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。通过相关性分析Pearson相关系数为0.949，P ＜ 0.01，故可以认为TGF-β1浓度与软脑膜纤维厚度呈直线正相关关系。 　　3 讨论 　　脑积水形成后患者可能发生神经功能受损等严重影响生活质量的症状，甚至直接危及生命中枢危害生命，因此对于脑积水的防治有着极其重要的意义。目前自发性SAH后形成慢性脑积水机制尚不明确，广泛认为SAH后在蛛网膜下腔