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- 2018-08-27 发布于湖北
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国家生化工程技术探究中心(北京)
国家生化工程技术研究中心(北京)
琼脂糖亲和介质(蓝胶)产品说明书
1. 产品简介
琼脂糖亲和介质(蓝胶)广泛用于白蛋白、干扰素、脂蛋白、凝血因子和激
+ +
酶、脱氢酶等需要NAD 和NADH 辅助因子的酶的分离纯化。
本中心开发的蓝胶以琼脂糖凝胶为基质,以普施安蓝(Procion blue MX-R )
为配基,该亲和介质具有良好的色谱性能,在推荐洗脱条件下具有较强的物理化
学稳定性,配基不易脱落,寿命长。
2. 产品特性
参数 指标
基质 6%交联琼脂糖凝胶
配基 Procion blue MX-R
形状 球形
介质平均粒径 90 μm (45-165)
配基密度 30-40 µmol Procion blue MX-R /ml wet gel
动态载量 8mg 溶菌酶/ml wet gel
最高流速 (25 ℃) 500 cm/h
最高耐压 0.3 MPa (3 bar)
pH 稳定性 4~12 (长时间);3~ 13 (短时间)
保存 4~8 oC (20% 乙醇)
3. 应用
蓝胶的层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡:用5~10CV 的平衡缓冲液(20 mM PB ,pH 7.0 )平衡层析柱,至流出
液电导和pH 不变(与平衡液一致)。
地 址:北京市海淀区中关村北二条1 号中国科学院过程工程研究所西区
电话/传真:010- 邮编:100190
网 址: 邮箱:hhqu@
National Engineering Research Center for Biotechnology (Beijing)
进料:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制;
低浓度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵
塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm )处理。进料量根据介质的载量和料液
中目标蛋白的含量计算。
淋洗:上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱:用洗脱缓冲液(20 mM PB+1M MgCl (或KCl) ,pH 7.0 )洗脱,收集
2
流出液。
再生、原位清洗:介质使用数次(5-10 次,具体次数与原料的种类和来源
及实验要求有关)后,需要对介质进行再生、原位清洗。
(1)用0.1M 的NaOH 以40cm/h 的速度清洗柱子3-5CV,然后用20% 的乙
醇清洗3CV,缓冲液洗到中性即可重复使用;
(2 )对疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质,可用3~4 CV 的70%乙醇
或30%异丙醇清洗,并用3~10 CV 的纯水冲洗。
其它注意事项:在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干而导致气
泡进入;第1 次使用时先用2M NaCl 冲洗5CV,洗去残留的染料,平衡后即可
使用。
4. 其他服务
(1)提供介质筛选及工艺开发的咨询。
(2 )接受客户委托开发各种分离介质和分离工艺。
(3 )按客户要求提供各种介质及相应规格的预装柱。
4
()为客户提供专业的售前和售后服务。
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