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活化: 让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态; 本质: 加快新陈代谢; 方法: 加入适量的水。 你能说出理由吗? 取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右使其活化 思考: 你认为酵母的活化操作有哪些注意事项? 1、所用容器要大一些; 2、要保证酵母菌的活性; 3、物种要单一; 4、注意水的用量。 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 称取无水Cacl2 0.83g。放入200mL的烧杯中,加入150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。 3、配制海藻酸钠溶液 操作: 称取0.7g海藻酸钠,放入50mL小烧杯中.加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10mL。注意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。 应当注意什么问题? 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的醉母细胞,进行充分搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中。 为什么海藻酸钠溶液要冷却? 5、固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的Cacl2溶液中,观察液滴在Cacl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30 min左右。 你知道还有什么地方可以用到氯化钙? 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。 (二)用固定化细胞发酵 1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。 2、 将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25℃下发酵24h。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察发酵的葡萄糖溶液; 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。 还有其他方法吗? 请思考课后练习 P52 类型 优点 不足 直接使用酶 催化效率高,低耗能、低污染等。 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 固定化酶 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 固定化细胞 成本低,操作更容易。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。 类型 优点 不足 练习: 1、制备固定化酵母细胞的过程中错误的是( ) A、取干酵母,加入蒸馏水,使其活化 B、配制海藻酸钠时,加热用大火,直到海藻酸钠溶化为止 C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞 D、将凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30 min左右 2、下列叙述不正确的是( ) A、从操作角度来考虑,固定化细胞比固定化酶容易 B、固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小 C、固定化细胞固定的是一种酶 D、将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞技术 选修1:生物技术实践 专题4 酶的研究与应用 知识回顾: 1、洗衣粉中添加________,可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和_________。 3、影响洗衣粉洗涤效果的因素有 _______ 。 在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂,说明酶制剂使用有很多优点,你能举出一些例子吗? 催化效率高、低能耗、低污染等。 酶制剂的使用有缺点吗? 你能举出一些例子吗? 酶制剂存在的缺陷:
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