杏鲍菇多糖提取工艺条件优化研究.docVIP

杏鲍菇多糖提取工艺条件优化研究 　　摘要 以杏鲍菇为原材料，以杏鲍菇多糖提取率为考察指标，采用超声波辅助酶法从杏鲍菇中提取多糖。通过单因素试验讨论了酶添加量、酶解时间、酶解温度、料液比4个因素对杏鲍菇多糖提取率的影响，然后通过正交试验确定超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖的最佳工艺条件。结果得出，最佳工艺条件为酶添加量0.4%、酶解温度55 ℃、酶解时间2 h、酶解的料液比1∶30。在此条件下，杏鲍菇多糖提取率为23.4%。 　　关键词 杏鲍菇；多糖；超声波辅助酶法；提取；正交试验；影响因素；工艺条件 　　中图分类号 S646；TQ281 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）17-0318-02 　　杏鲍菇又被称作刺芹侧耳，是一类常见的大型食用型真菌。具有杏仁的芳香型气味，咀嚼起来就像是吃鲍鱼，因此被命名为杏鲍菇。杏鲍菇主要生长环境在亚热带草原干旱沙漠地区，对于生长的条件较高。杏鲍菇含有丰富的营养类物质，其营养成分主要有碳水化合物、蛋白质、维生素、钙、镁、锌、酮等矿物质。杏鲍菇中含有大量的多糖，杏鲍菇多糖具有加强机体免疫能力、降低血糖、抗癌等作用[1]。随着对多糖功能性质的深入研究，多糖的来源和提取工艺越来越受到研究工作者的重视。近年来，杏鲍菇被大面积的开发栽培，故以杏鲍菇为原材料提取多糖。 　　本试验对超声波辅助酶法提取杏鲍菇中的多糖工艺进行了研究，超声波辅助酶法提取具有提取温度低、效率高、时间短、操作方便等优点。超声波法和酶法提取近年来在多糖提取领域得到了广泛的应用。将两者结合，分析酶添加量、超声波条件下的提取时间、超声波下提取温度、提取料液比的影响，通过正交试验确定最佳方法对杏鲍菇多糖进行提取，以期为杏鲍菇的开发利用提供依据[1-3]。 　　1 试验方法 　　1.1 杏鲍菇多糖的提取工艺流程 　　杏鲍菇预处理→超声波辅助纤维素酶水解→沸水浴灭酶10 min→4 500 r/min离心10 min取上清液→用苯酚-硫酸法测定含量。 　　操作要点：将杏鲍菇鲜品去杂切成薄片，沸水浴灭活酶5 min，在恒温鼓风干燥箱中烘干至恒重，加入95%乙醇按料液比1∶2（g/mL）常温浸提，每次24 h，浸提3次。过滤后将去脂后的杏鲍菇片在鼓风干燥箱中烘干，再用粉碎机粉碎过80目筛储存备用[4-6]。称取预处理过的杏鲍菇干粉5 g（精确至0.01 g），按照选定的条件放入超声波粉碎仪中进行破壁处理。然后在水浴中浸提，离心过滤得到杏鲍菇多糖提取液。最后用苯酚-硫酸法测定提取液中的多糖含量。 　　1.2 杏鲍菇多糖含量的测定及多糖提取率的计算 　　采用苯酚-硫酸法在490 nm下测定提取液的吸光度，然后根据吸光度计算多糖含量，并计算提取率。 　　杏鲍菇多糖提取率（%）=杏鲍菇多糖含量×提取液体积/杏鲍菇质量×100 　　1.3 超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖单因素试验 　　1.3.1 酶添加量对多糖提取率的影响。分别称取5份杏鲍菇子实体干粉，料液比为1∶30、超声波的条件下，调节pH值为5，反应温度为50 ℃，反应时间为1.5 h，研究纤维素酶加量分别为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%时对杏鲍菇多糖提取率的影响。 　　1.3.2 酶解时间对多糖提取率的影响。分别称取5份杏鲍菇子实体干粉，在料液比为1∶30、超声波的条件下，酶添加量为0.2%，pH值为5，反应温度为50 ℃，研究反应时间分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h时对杏鲍菇多糖提取率的影响。 　　1.3.3 酶解温度对多糖提取率的影响。分别称取5份杏鲍菇子实体干粉，在料液比为1∶30、超声波条件下，酶添加量为0.2%，调节pH值为5，设定酶解时间为1.5 h，研究反应温度分别为35、45、55、65、75 ℃时对杏鲍菇多糖提取率的影响。 　　1.3.4 料液比对多糖提取率的影响。分别称取5份杏鲍菇子实体干粉，在超声波的条件下，温度为50 ℃，酶添加量为0.2%，pH值为5，酶解时间为1.5 h，研究料液比分别为1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50时对杏鲍菇多糖提取率的影响。 　　1.3.5 超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖的正交试验。为了综合考虑各种提取因素间的相互作用，以及对杏鲍菇多糖提取率的影响，通过超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖的单因素试验的结果，选择适宜的因素水平（表1），根据L9（34）正交试验表进行正交试验，优化超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖的提取条件，确定超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖的最佳提取工艺。 　　2 结果与分析 　　2.1 单因素试验 　　2.1.1 酶添加量对多糖提取率的影响。随着酶添加量的增加，杏鲍菇多糖粗提取率逐渐增加，这是由于底物与酶接触面增大，使酶对多糖提取效率增加。当