槐米多糖的提取和纯化工艺研究.docVIP

槐米多糖的提取和纯化工艺研究 　　摘要：为探讨中药槐米中可溶性粗多糖的提取工艺，通过单因素试验和Ｌ９（３３）正交试验，研究了提取温度、料水质量比、提取时间对多糖提取率的影响。结果显示，３个因素对多糖提取率的影响顺序为提取时间、料液比、提取温度，最佳提取工艺为提取温度９０ ℃，料水质量比１∶１５，提取时间９０ ｍｉｎ，所得槐米粗多糖的提取率为５．１０％。对槐米粗多糖脱蛋白方法的研究显示木瓜蛋白酶＋Ｓｅｖａｇ法脱蛋白处理效果优于Ｓｅｖａｇ法和３％三氯乙酸法。 　　关键词：槐米多糖；提取工艺；正交试验 　　中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）15－3161-03 　　 　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｅｘｔｒａｃｔｉng Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｆｌｏｓ Ｓｏｐｈｏｒａｅ Ｉｍｍａｔｕｒｕｓ 　　 　　ＺＨＯＵ Ｙｉｎｇ，ＸＩＡ Ｘｉｎ－ｋｕｉ 　　（Ｘｉｎｙａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｘｉｎｙａｎｇ ４６４０００，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ of Ｌ９（３３） ｗere ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｆｌｏｓ Ｓｏｐｈｏｒａｅ Ｉｍｍａｔｕｒｕｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｒａｔｅ， ｅｘｔｒａｃｔｉng ｔｉｍｅ ｈａｄ ｔｈｅ ｇｒｅａｔｅｓｔ ｉｍｐａｃｔ， ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ， ｗｈｉｌｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｈａｄ ｔｈｅ ｌｅａｓｔ ｉｍｐａｃｔ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗａｓ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ９０ ℃， ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ １∶１５（m/V，g∶mL）； ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｔｉｍｅ ９０ ｍｉｎ． Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｒａｔｉｏ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｆｌｏｓ Ｓｏｐｈｏｒａｅ Ｉｍｍａｔｕｒｕｓ ｗａｓ ５．１０％． Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ｆｒｏｍ ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ Ｓｅｖａｇ ｍｅｔｈｏｄ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ papain ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ Ｓｅｖａｇ ｍｅｔｈｏｄ ａｌｏｎｅ ｏｒ ３％ ＴＣＡ ｍｅｔｈｏｄ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｆｌｏｓ Ｓｏｐｈｏｒａｅ Ｉｍｍａｔｕｒｕｓ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ； ｅｘｔｒａｃｔｉng ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ； orthogonal design 　　多糖作为参与生命活动的基本物质之一，常是细胞表面信号识别、抗原抗体反应、细胞间信息的传递和感受的关键因子，在抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血等方面均起到一定的作用。多糖种类繁多，广泛存在于动物、植物、微生物中。为充分开发多糖资源，近年来我国对植物多糖，特别是具有中国特色的中草药多糖的药物活性进行了广泛研究。槐米（Ｆｌｏｓ Ｓｏｐｈｏｒａｅ Ｉｍｍａｔｕｒｕｓ）别名白槐、柚花、槐蕊，为豆科植物槐（Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｌ．）的花蕾或花朵，性微寒，味苦［１］。近代医学研究证明，槐米具有一定的抑菌、抗癌、保健等药理作用，其主要成分芦丁具有抗菌消炎，防止血管破裂和止血作用，对紫外线具有极强的吸收作用，而且具有很好的抗氧化作用［２，３］。但对槐米多糖的研究还鲜见报道。以槐米粗多糖的提取率为考察指标，采用单因素试验和Ｌ９（３３）正交试验对提取过程中温度、料液比、提取时间３因素进行了优化；对粗多糖的脱蛋白方法进行了选择，旨在为槐米多糖的开发利用提供参考。 　　１材料和方法 　　１．１材料和仪器 　　１．１．１材料槐米购自信阳市药材公司，产地为河南，经信阳农业高等专科学校药用植物教研室鉴定为中药槐米。 　　１．１．２试剂甲醇、乙醇、丙酮、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、氯仿、正丁醇、三氯乙酸、木瓜蛋白酶均为国产分析纯。Ｓｅｖａｇ试剂：氯仿与正丁醇体积比为５∶１。 　　１．１．３主要仪器电热恒温水浴槽，北京市医疗设备厂；Ｚ３２３Ｋ高速冷冻离心机