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基于含有活性铜碳点电化学传感器选择性检测尿酸 　　摘 要 采用水热法制备了含有活性铜的碳点，利用荧光光谱和紫外可见吸收光谱对其光学性质进行了表征。通过电沉积法将其修饰于玻碳电极表面， 构建了电化学生物传感器，采用循环伏安法、交流阻抗法和差分脉冲伏安法对电极的电化学行为进行了考察， 并对其电化学反应机理进行了探讨。结果表明，此传感器对尿酸具有良好的电催化效果，可有效消除抗坏血酸和多巴胺等物质的干扰。在最佳条件下，氧化峰电流与尿酸的浓度在1.00～300 μmol/L范围内呈良好的线性关系， 检出限为0.30 μmol/L（S/N=3）。此传感器具有制作简单、选择性好、灵敏度高和线性范围宽等优点，有望应用于实际样品的检测。 　　关键词 活性铜； 碳点； 电化学； 生物传感器； 尿酸 　　1 引 言 　　尿酸（UA）是人体嘌呤的代谢产物[1]，在体内含量过高会导致痛风性关节炎、高尿酸血症和Lesh Nyan综合症等疾病[2]。近年来，随着生活水平提高，越来越多的人处于尿酸过高的亚健康甚至疾病状态。由此可见，UA浓度的准确检测在临床医学领域具有重要意义。发展灵敏、快速、低廉的UA检测方法非常重要。 　　目前，UA的测定方法有色谱法[3]、分光光度法[4]、荧光法[5]、化学发光法[6]、电化学发光法[7]、电化学法[8，9]等。其中，电化学方法具有选择性好、灵敏度高、操作简单和成本低廉等优点而广泛应用于UA的测定[10]。然而，传统电极上其氧化电位与抗坏血酸（AA）的电位接近，容易受到AA的影响[11]。为了解决这一问题，已发展很多策略。Hiroaki等[12]报道了一种铜修饰电极选择性检测UA。Cu可与UA形成配合物，沉积在电极表面，将AA与UA很好地区分。另一方面，纳米材料具有独特的光学与电学性质以及比表面积大、反应活性高、吸附能力强等优良特性，为电极的表面修饰提供了新的研究途径[13]。 　　碳点是尺寸小于10.0 nm的纳米颗粒，是近年发展起来的一类新型“零维”碳纳米材料。由于其具有优良的光学性质、良好的生物相容性、化学惰性及低毒性，引起了研究者的关注，成为材料科学前沿领域的一个新研究热点[14]。在过去的几年里，碳点的研究已经取得许多重要成果，在生物成像[15]、药物输送[16]、传感器[17]及能量转换[18]等领域得到很大发展。最近，Ren等利用水热法合成了具有类酶性质的含有活性铜的碳点（CuCDs）[19]， XPS分析该碳点中的铜呈现0和+1价， 该材料能够将活性铜对UA的选择性检测与碳点优良的电催化性质结合起来。 　　本研究首先采用水热法合成含有活性铜的碳点，通过电沉积法将其修饰在玻碳电极表面，制备CuCDs/GCE电极，如图1所示。利用碳点较大的比表面?e和高的电子传递速率， 以及活性铜对电极界面上基质的电子转移速率的促进作用和对UA的选择性，实现对UA的测定。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　F4000型荧光分光光度计（日本日立公司）； Shimadzu 3600 UVVis光谱仪（日本岛津公司）； CHI660A电化学工作站（上海辰华仪器有限公司），采用三电极系统：以饱和甘汞电极为参比电极，Pt丝电极为对电极，裸玻碳电极（GCE，φ=3 mm）或修饰玻碳电极为工作电极； ZF20D暗箱三用紫外分析仪（上海骥辉科学仪器有限公司）。 　　聚甲基丙烯酸钠（PMAA，30%，Sigma 公司）； UA、AA、多巴胺（DA）、Cu（NO3）2、K3Fe（CN）6、K4Fe（CN）6（国药集团化学试剂有限公司）。0.100 mol/L磷酸盐缓冲溶液（PBS）由NaH2PO4、Na2HPO4和KCl 配制，并用0.100 mol/L H3PO4或NaOH调节pH值。实验所用试剂均为分析纯，实验用水为超纯水。 　　2.2 含有活性铜碳点的制备 　　采用水热法一步合成含有活性铜碳点[20]： 首先称取2.50 g PMAA和适量Cu（NO3）2于烧杯中，加入50.0 mL去离子水， 混合均匀后倒入水热反应釜中，240℃反应9 h。 所得产物13000 r/min离心30 min， 去除溶液中的大颗粒残渣。用截留分子量为1 kD的透析袋透析纯化12 h， 最终在4℃下避光保存。 　　不含活性铜碳点的制备方法同上，所不同的是将PMAA和Cu（NO3）2的混合溶液换成PMAA溶液。 　　2.3 修饰电极的制备 　　分别用粒径为1.00、0.30和0.05 μm的氧化铝粉末配合麂皮打磨电极，再依次用丙酮、乙醇和去离子水超声清洗。将其置入含有活性铜的碳点溶液中，利用电沉积法，在0～2.0 V的电位范围以100 mV/s扫速循环扫描10圈，制得CuCDs/GCE电极。将打磨好的玻碳电极置于不