多参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病研究进展.docVIP

多参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病研究进展 　　【摘 要】本文通过综述多参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病的研究进展，进而得出结论：多参数流式细胞术检测微小残留病对急性髓系白血病的治疗具有重要的指导意义。建立MFC检测MRD的标准化是今后研究发展的方向。 　　【关键词】微小残留病;多参数流式细胞术;研究;检测 　　随着化疗方法的改进、造血干细胞移植技术的进步，急性白血病患者的完全缓解率和5年生存率已经得到显著性的提高。然而还是有部分患者达到完全缓解后会出现复发情况，进而对患者的长期生存率造成影响。通过研究复发的原因，发现患者体内存在的微小残留病（minimal residual disease，MRD）是导致患者复发的主要原因。因此，MRD正逐渐成为急性白血病评价预后的独立指标。为此，寻找最佳的检测技术对MRD进行检测十分重要。现本文结合实际对参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病进行研究，以期为实践提供参考依据。 　　1多参数流式细胞术（MFC）检测MRD的优势 　　和其他检测技术相比，MFC可以对处于快速直线流动状态中的单个细胞进行形态、大小及荧光特征进行识别，从而区分白血病细胞和正常细胞[1]。其每秒可检测成千甚至上万个细胞，并对检测的细胞进行快速多参数定量分析，灵敏度达10-4-10-5。MFC通过对白血病相关免疫表型检测，比RQ-PCR技术更广泛、直观地对残留白血病细胞进行准确定量[2]，目前MRD已经可用于大于90%以上的急性髓系白血病的免疫表型检测。因此，MFC是急性髓系白血病MRD的检测中最有前景的一种检测方法。 　　2多参数流式细胞术（MFC）检测MRD的方法 　　白血病相关免疫表型（LAIPs）是在正常血液细胞或骨髓细胞表面不表达或非常罕见的表型，诊断是通过比较白血病细胞与正常骨髓细胞表面标志确定的，是MFC检测MRD的基础。根据异常抗原的表达主要将LAIPs分为四类：（1）不同步抗原表达;（2）谱系失真/跨系抗原表达;（3）抗原表达量的异常;（4）荧光表达强度的变化。[3]MFC在急性髓系白血病中监测MRD的研究策略主要遵循以下几步：（1）通过多色方案鉴别病人特异性的白血病相关免疫表型（LAIPs）;（2）在完全缓解时和缓解后治疗中用病人特异性的LAIPs追踪MRD;（3）将MRD与病人的复发、长期无复发/无病生存、总生存等预后和治疗关联，以更好地指导治疗。 　　3多参数流式细胞术（MFC）检测MRD的意义 　　3.1有助于危险度分层 　　目前，急性髓系白血病患者危险度评估主要依据临床及生物学特征，包括初发时患者的年龄、外周血白细胞计数、染色体核型和基因异常等。然而，这些临床及生物学指标对危险度分层并不够理想。因此，根据MRD水平对患者危险度分层就十分必要。San Miguel JF等[4]根据MFC检测的MRD水平对诱导缓解后的患者进行危险度分层，分别是极低风险组（lt;10-4），低风险组（10-4～10-3），中度风险组（10-3～10-3）和高风险组（gt;10-2），3年复发率分别为0%，14%，50%和84%，因此，早期对急性白血病进行危险度分层具有重要的临床指导意义。 　　3.2有助于对预后及复发情况进行判断 　　急性白血病患者在初次诊断是体内的白血病细胞数大约有1012个，经过诱导缓解达完全缓解是体内的白血病细胞仍残留108-109个。体内残留白血病细胞数的不同提示预后不同。路萍[5]分析43例急性白血病患者发现MRDgt;10-4组复发率78.57%，MRD10-4组复发率10.53%，认为持续10-4可视为预后良好的指标之一，而且在该研究的复发病例中，MRD阳性出现明显早于形态学改变，时间3-6个月不等，提示MRD预测白血病复发是早于形态学检查的，提示MRD是判断预后和预测复发的一个敏感指标，高水平的MRD是预后不良的一个独立危险因素。 　　3.3有助于对个体化治疗进行指导 　　目前对急性白血病患者的治疗采用个体化治疗原则，在治疗中如何评价复发的危险程度是个体化治疗的关键。治疗期间动态监测患者白血病细胞的MRD水平直接反映体内白血病细胞的负荷量，根据体内白血病细胞的负荷决定下一步的治疗方案。对于MRD为低水平的患者，可以选择化疗强度弱的方案，避免过度治疗;对于MRD为高水平的患者，则应给予化疗强度大的化疗方案或造血干细胞移植，这样可以做到有的放矢，以延长患者的生存期，提高生活质量。 　　3.4在造血干细胞移植中的应用 　　施晓兰等[6]研究中84例患者在造血干细胞移植前进行了MRD检测，65例阳性患者移植后有18例出现复发，19例阴性患者移植后无复发。移植后监测MRD水平，当出现MRD水平增高时，均及时接受临床干预治疗，临床预后