婆罗门参提取液致突变实验研究.docVIP

婆罗门参提取液致突变实验研究 　　【摘要】 目的 婆罗门参提取液的致突变作用。方法 小鼠骨髓细胞微核实验、小鼠睾丸染色体畸变实验、Ames实验。结果 婆罗门参提取液对小鼠骨髓细胞微核无明显的升高作用，小鼠睾丸染色体畸变试验各实验组与阴性对照组比较无显著性差异，Ames实验结果为阴性。结论 在本次实验条件下，婆罗门参提取液未显示有致突变作用。? 　　【关键词】婆罗门参提取液；突变 　　 　　婆罗门参又称西洋牛蒡,为菊科婆罗门参属2年生草本植物,原产于欧洲南部的希腊、意大利等地,有200多年的栽培历史。婆罗门参肉质根肥大，可烤、煮、炸或作汤，有一种牡蛎鲜味,被称为“蔬菜牡蛎”，嫩茎叶也可生食。我国只有零星种植,欧美国家栽培较多.婆罗门参具有治疗黄疸病、提神利尿的功效,还可作为观赏植物，是一种很有发展前景的根茎类蔬菜。为了更好地开发利用这一新的植物，在研究了一般毒性的基础上进行了微生物回复突变性实验(Ames实验)、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验、小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变实验以了解其有无致突变作用[1-2]。保证食用安全提供科学依椐。现将结果报告如下。 　　 　　1 资料与方法 　　 　　1．1 一般资料 受试物婆罗门参提取液为微黄色液体，溶于水。由汉氏保健食品有限公司提供。 　　1．2 方法 　　1．2．1 微生物回复突变性试验(Ames试验) 采用平板掺入法。分别用加与不加S?9混合液两种方法进行试验。剂量分别为每皿5 000 μg、1 000 μg、200 μg、40 μg，另设阴性空白对照组和阳性对照组。每一浓度三皿，每个剂量均重复一次。菌株为TA97、TA98、TA100、TA102。结果以回变菌落数超过自发菌落数2倍以上且有剂量一反应关系为阳性。 　　1．2．2 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验 昆明种小鼠50只。由四川省抗菌素工业研究所实验动物中心提供，合格证号为川实动质2003-004号，体质量25~30 g。随机分为5组，每组l0只，雌雄各半。设3个剂量组。分别为5．0 g/(kg#8226;BW)、10．0 g/(kg#8226;BW)、20．0 g/(kg#8226;BW)，经口灌胃给药。另设阴性对照组(蒸馏水)、阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg#8226;BW)。腹腔注射。该药由上海华联制药有限公司提供,批。采用30 h给药法,即2次给药间隔24 h，于第2次给药后6 h取骨髓制片。每只动物计数1 000个嗜多染红细胞，计算微核率。用卡方检验进行统计学分析处理。 　　1．2．3 小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验 雄性昆明种小鼠25只，四川省抗生素工业研究所实验动物中心提供，合格证号为川实动质2003-004号，体质量30~35 g，随机分为5组。每组5只，给药剂量分别为5．0 g/(kg#8226;BW)、10．0 g/(kg#8226;BW)、20．0 g/(kg#8226;BW)。一次经口灌胃给药。另设阴性对照组(蒸馏水)、阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg.BW)。于动物处死前6 h腹腔注射秋水仙素(4 mg/kg.BW)。动物处死后立即取出睾丸，剥除被膜。用眼科剪充分剪碎后移入离心管，加入0．4%氯化钾溶液于室温下低渗15 min，加固定液固定二次。最后一次固定后吸出固定液，加入６０%冰乙酸软化曲细精管，再加成倍量的固定液固定，离心，吸去上清液，则制备细胞湿悬液。将细胞混悬液均匀地滴于冰水玻璃片上，空气干燥法制片，Giemsa染色２０ min。每只动物观察100个分散良好的中期分裂相。记录发生畸变的类型和数量。将断片和易位合并为染色体结构畸变。数据按Kastenbaum和Bowman所述方法处理[5]。早熟分离(性染色体和常染色体单价体)则单独统计学处理。 　　 　　2 结果 　　 　　2．1 鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)各剂量组在加与不加S?9混合液的两种情况下，各试验皿回变菌落数与阴性对照组比较均未超过各测试菌株自然回变数的2倍。结果为阴性。试验数据见表1。? 　　 　　2．2 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验各剂量组微核率与阴性对照组比较差异无统计学意义(P0．05)。而阳性对照组与其他各组比较差异有统计学意义(P0．01)。结果见表2。? 　　 　　2．3 小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变 婆罗门参提取液对小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验结果见表3。与阴性对照组相比，环磷酰胺４０mg/kg.BW能明显致小鼠睾丸初级精母细胞染色体结构畸变率升高(P0．05)。3个给药组的性染色体和常染色体单体发生率与阴性对照组相比，差异无统计学意义(P0．05)根据试验结果，认为在本次试验剂量范围内。婆罗门参提取液对小鼠睾丸初级精母