基因组学-2011年幻灯片.pptVIP

2008年1月，华大基因研究院和国际同行提出“国际千人基因组计划”。 万种微生物基因组计划，微生物的基因比人的要少得多，大约有人的千分之一左右，现在华大基因已经做了400种左右， 华大取“猪坚强” 耳组织，进行胚胎克隆，在2011年5月12日将克隆胚胎移植入两头代孕母猪体内。于2011年8月31日成功产出6头“小猪坚强”。 例如：基因全长5900bp * * * * STS:一对PCR引物扩增的单一的片段. STS是染色体切成更小的片段.分段克隆 克隆载体的容量非常重要,每个载体的插入片段过小,克隆数目将过于庞大,而无法操作.例如:装配型质粒(cosmid) 插入片段限制35-45kb,至少要105个克隆才能将30亿个bp的基因组克隆到载体上. BAC(bacterial artificial chromosome): 细菌人工染色体, 能携带大的DNA片段(约150kb) YACa(yeast artificial chromosome): 酵母人工染色体, 能携带大的DNA片段(约150kb-1.5Mb) 酶切后找出含有STS序列的DNA重叠片段---组装成连续重叠的DNA片段(contigs) 绘出全基因组图谱 * 将获得的目的基因的cDNA克隆，进行测序，确定两端的cDNA序列，约200bp，设计合成引物，并分别利用cDNA和基因组DNA作模板扩增；利用STS