孕妇外周血中游离胎儿DNA检测在诊断胎儿染色体异常中应用价值.docVIP

孕妇外周血中游离胎儿DNA检测在诊断胎儿染色体异常中应用价值 　　摘要：目的：探讨孕妇外周血中游离胎儿DNA检测在诊断胎儿染色体异常中的应用价值。 　　方法：选择存在高龄、唐氏筛查高风险、有不良妊娠史、孕期B超提示胎儿异常或其他异常情况等高危因素的孕妇1000例，随机分为两组，其中500例直接进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养染色体核型分析；500例抽取孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测，阳性者再进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养染色体核型分析。并电话或上门随访至今新生儿情况。 　　结果：羊膜腔穿刺组阳性孕妇8例，阳性率1.60%；孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测组阳性孕妇7例，阳性率1.40%，两组阳性率对比，无统计学差异，P0.05。羊膜腔穿刺组发生感染、出血、流产、死胎等并发症16例，发生率3.20%，孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测组无1例发生并发症，两组发生率对比，有显著性差异，P0.05。孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测组阳性孕妇7例进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养染色体核型分析，结果符合，诊断准确率100%。随访至今，共870例新生儿出生，均未见或未发现可疑唐氏综合征。 　　结论：孕妇外周血中游离胎儿DNA检测在诊断胎儿染色体异常准确性高，且无并发症。 　　关键词：孕妇外周血 游离胎儿DNA检测 羊膜腔穿刺 羊水细胞培养染色体核型分析 胎儿染色体异常 　　【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）10-0118-01 　　胎儿染色体可反映是否存在遗传病，传统检验方法为有创性，易产生合并症。随着孕妇外周血中游离胎儿DNA的发现，为早期确诊胎儿染色体异常提供新途径[1]。为进一步研究其在临床诊断中的价值，特对在我院收治孕妇进行检测分析，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料。本组研究对象共为1000例，为我院2012年10月～2013年06月间来院进行产前诊断并存在高龄、唐氏筛查高风险、有不良妊娠史、孕期B超提示胎儿异常或其他异常情况等高危因素的孕妇的孕妇。根据自愿原则分为两组，其中500例直接进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养染色体核型分析，设为对照组；500例抽取孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测，阳性者再进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养染色体核型分析孕，设为研究组。孕妇年龄20～44岁，经B超检查均为单胎，孕周（20.42±3.82）周。所有孕妇均存在产前诊断指征。自愿参加研究并填写知情同意书。 　　1.2 方法。详细记录孕妇出生日期、末次月经时间、孕产史、体重、家庭住址及联系方式。保留唐氏筛查及超声检查报告单。研究组抽取孕妇肘部静脉血5ml，加入抗凝剂乙二胺四丁酸。置于2000×g离心机进行10min离心处理，后抽取上清置于EP试管内置于16000×g离心机再次离心处理并抽取上清，结束后置于-80℃冰箱内低温保存备用。取冷冻上清采用QIAamp Blood DNA midi试剂盒进行血浆DNA提取。所有操作均严格按照说明书进行。鉴定以另取健康男性和未孕女性外周静脉血2ml为SRY为阳性和阴性对照，以G6PD基因为引物。扩增以Y染色体上SRY为靶序列，据扩增片段大小选择电泳琼脂糖浓度，染色以溴乙锭进行，扩张结果均在紫外线灯下进行，并将胎儿游离DNA扩增SRY阳性标本测序。对照组孕妇严格消毒后进行羊膜腔穿刺，抽取羊水，进行羊水细胞培养染色体核型分析。 　　1.3 观察指标及随访。观察两种检查阳性率及并发症情况。所有患者均采用电话或上门随访，观察分娩后新生儿情况。 　　1.4 统计学处理。以统计学软件包SAS 9.0进行分析，计数资料采取率的比较X2检验，P0.05为有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 羊膜腔穿刺组500例，阳性孕妇8例，阳性率1.60%；孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测组500例，阳性孕妇7例，阳性率1.40%，两组阳性率对比，无统计学差异，P0.05，羊膜腔穿刺组发生感染、出血、流产、死胎等并发症16例，发生率3.20%，孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测组无1例发生并发症，两组发生率对比，有显著性差异，P0.05，见表1。 　　2.2 孕妇外周血进行游离胎儿DNA检测组阳性孕妇7例进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养染色体核型分析，结果完全符合，诊断准确率100%。 　　2.3 随访结果。两组检测结果阴性患者共985例，经电话或上门随访至今，共870例新生儿出生，均未见或未发现可疑唐氏综合征。 　　3 讨论 　　产前诊断是临床重要检查项目，可在新生儿分娩前确定遗传病方法，从而为预防新生儿遗传病依据。以往产前诊断均为有创性诊断方法，以羊水或绒毛膜穿刺术等为主，但本身为侵入性操作，使感染、流产等不良反应发生率明显增加[2]。 　　孕妇血液