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PAGE PAGE 1 现代生物技术概论复习提纲 第六章 蛋白质工程 1. 了解蛋白质分子之间的相互作用； 蛋白质的亚基可以被解离成游离亚基，在一定条件下又可以重新聚合；某些具有四级结构的蛋白质分子之间，亚基可以聚合，产生有活性的杂交分子；不少多肽和蛋白质分子，不论其是否由亚基组成，都能聚合成聚合物。 2. 蛋白质工程的基本任务； 以蛋白质结构与功能为基础，通过化学和物理手段，对目标基因按预期设计进行修饰和改造，合成新的蛋白质；对现有的蛋白质加以定向改造、设计和构建，最终生产出比自然界存在的蛋白质更优良、更符合人类需求的功能蛋白质。 3. 图6-6蛋白质工程研究策略，利用反向生物学手段； 蛋白质工程的主要研究手段：利用所谓的反向生物学技术，其基本思路是按期望的结构寻找最适合的氨基酸序列，通过计算机设计，进而模拟特定的氨基酸序列在细胞内或在体内环境中进行多肽折叠而成三维结构的全过程，并预测蛋白质的空间结构和表达出生物学功能的可能及其生物活性的高低程度。 4. 改变先有蛋白质结构的基本步骤； ①分离纯化目标蛋白质。 ②分析目标蛋白质的一级结构；分析目标蛋白质的三维结构以及结构与功能的关系。 ③根据蛋白质的一级结构设计引物，克隆目的基因。 ④根据蛋白质的三维结构和结构与功能的关系以及蛋白质改造的目的设计改造方案。 ⑤对目的基因进行人工定点突变。 ⑥改造后的基因在宿主细胞中表达。