生物化学教学课件第十四章dna的生物合成刘皓.ppt

3?-OH 5?-P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 5 滚环复制 5 ?? 5? 3? 3? 5? A蛋白 DNA损伤（突变）与修复 DNA Damage (Mutation) Repair 第五节 DNA损伤：各种体内外因素所导致的DNA组成与结构的变化,也称DNA突变。 DNA损伤的诱发因素 在每个细胞中每天都会产生成千上万的DNA的损伤,这些损伤来源于细胞内和生物体内的生理活动以及外源的辐射(如紫外线)、化学物质的侵袭等。 DNA损伤的类型: 碱基损伤与糖基破坏； 碱基错配、插入与缺失；DNA链的断裂和共价交联等 DNA损伤的后果： １、导致复制或转录障碍（如胸腺嘧啶二聚体，DNA骨架中产生切口或断裂） ２、导致复制后基因突变 DNA损伤的修复 正常生命活动过程中伴随各种DNA结构改变，如DNA 复制错误、复制过程中单链形成，抗体基因形成中的DNA断裂、重组和突变,DNA 修饰和去修饰等，这些过程需DNA 结构状态监控和修复因子参与; 自然进化过程中，生物进化出一套极其复杂又高度协调的DNA 损伤监控和修复系统，以分别应对和修复种类繁多的DNA损伤． DNA损伤的修复(repairing)是纠正DNA两条单链间错配的碱基、清除DNA链上受损的碱基或糖基、恢复DNA的正常结构的过程。 直接修复 切除修复 重组修复 SOS修复 修复的主要类型： （一）直接修复 光修复酶(photolyase) UV 嘧啶二聚体的光复合修复 （二）切除修复:生物界最普遍的一种DNA修复方式 碱基切除修复 核苷酸切除修复 碱基错配修复 托马斯·林达尔完成了“碱基切除修复”的拼图 在此位点的5’末端，无碱基位点核酸内切酶水解磷酸二酯键，去除该核苷酸剩余的磷酸核糖部分。 阿齐兹·桑贾尔：研究细胞如何修复紫外线损伤 保罗·莫德里奇：解释“DNA错配修复” RecA （三）重组修复 （四）SOS修复 当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 小结 几个定义： 半保留复制、双向复制、半不连续复制、 　　冈崎片段、引发体、端粒酶 几个问题： 　　1、原核生物的复制过程 2、复制的保真性相关机制 3、爬行模型 HO 5’ 3’ 3’ 5’ DNA连接酶 ATP ADP 5’ 3’ 5’ 3’ DNA连接酶的作用： DNA连接酶并不能连接单独存在的单链DNA缺口，它所连接的都是在碱基互补的基础上的缺口。 DNA连接酶也可连接DNA两股链都有的缺口，但缺口的碱基必须互补。 a.DNA连接酶在复制中起最后接合缺口的作用。 b.在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。 c.也是基因工程的重要工具酶之一。 功能： DNA聚合酶，拓扑酶和连接酶催化3?,5?-磷酸二酯键生成的比较 提供核糖3?-OH 提供5?-P 结果 DNA聚合酶 引物或延长中的新链 游离dNTP去PPi (dNTP)n+1 连接酶 复制中不连续的两条单链 不连续→连续链 拓扑酶 切断、整理后的两链 改变拓扑状态 DNA生物合成过程 The Process of DNA Replication 第 三 节 （一）复制起始：DNA解链形成引发体 需要解决两个问题： 1. DNA解开成单链，提供模板。 2. 形成引发体，合成引物，提供3?-OH末端。 一、原核生物的DNA生物合成 E.coli复制起始点 oriC GATTNTTTATTT ··· GATCTNTTNTATT ··· GATCTCTTATTAG ··· 1 13 17 29 32 44 ···TGTGGATTA-‖-TTATACACA-‖-TTTGGATAA-‖-TTATCCACA 58 66 166 174 201 209 237 245 串联重复序列 反向重复序列 5? 3? 5? 3? 1. DNA解链 富含AT区 识别区 Dna A Dna B、 Dn