嗜酸性粒细胞计数P36新版10.pptVIP

[注意事项] 1.本实验必须在1h内完成，否则细胞被破坏，结果偏低； 2.及时混匀，不能过分振荡，以免细胞破坏； 3.统一采血时间，以免受生理变化； * jgyj 4.注意与N区别，以免结果偏高； （N着色浅，颗粒小） 5.含乙醇、丙酮等保护剂会挥发，应注意其变化； 6.溴甲酚紫在酸性或中性时为橙黄色，在碱性显蓝，故器具要防酸。 * jgyj [方法学评价] 1．显微镜计数法? 所需设备简单，简便易行； 求得的嗜酸粒细胞绝对值，比用白细胞总数和分类计数间接推算出的来的准确。 但重复性差，精确性不如血液分析仪法。 所采用的稀释液多种，其优缺点见表2-47 * jgyj * jgyj 2．血液分析仪法? 五分类血液分析仪是目前最有效的嗜酸粒细胞计数的筛检方法， 分析速度快，准确性较高。 但仪器昂贵；当仪器提示嗜酸粒细胞增多伴直方图或散点图异常时，应采用显微镜直接计数法复检。 * jgyj [临床意义] 生理变化 肾上腺皮质激素的作用: ①阻止骨髓释放E; ②使血中E到组织中去。 1）劳动、寒冷、饥饿、各精神刺激等→ 交感神经兴奋→ACTH↑→肾上腺皮质激素↑ →E↓。 * jgyj 2）年龄： 5岁以下 （0-0.8）×109/L 5-15岁 （0-0.5）×109/L 3）日间变化： 上午波动大，下午较恒定。 与糖皮质激素脉冲式分泌有关。 * jgyj bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo 嗜酸性粒细胞计数P36 临床检验基础教研室 程杨艳 * jgyj 嗜酸粒细胞起源于骨髓多能造血干细胞，为髓系干细胞分化而来的嗜酸粒细胞祖细胞（CFU-EO）所产生。 功能： （1）微弱的吞噬作用，基本无杀菌力； （2）主要作用是限制过敏反应的作用： ①抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞； ②吞噬其释放颗粒； ③分泌组胺酶破坏组胺； （3）参与蠕虫的免疫反应。 * jgyj 嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源 ①从嗜碱性粒细胞和肥大细胞来源的组胺； ②从补体来的C3aC5a； ③从致敏淋巴细胞来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； ④从寄生虫来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； ⑤某些细菌来的嗜酸性粒细胞的趋化因子； ⑥从肿瘤来的嗜酸性粒细胞的趋化因子。 趋化因子↑→E↑ * jgyj 嗜酸性粒细胞绝对数=WBC×E% 其中E%（嗜酸性粒细胞分类的比值）不准，进推算的绝对值误差较大； 故为达到准确计数嗜酸性粒细胞的目的，须做嗜酸性粒细胞直接计数。 * jgyj [原理] 用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时使红细胞和大部分其他白细胞被破坏，并将嗜酸粒细胞着色，充入计数板，低倍镜下计数2个计数池共10个大方格内的嗜酸粒细胞数，经换算求得每升血液中的嗜酸粒细胞数。 * jgyj [器材] ①采血针、干棉球、75%酒精棉球 ②试管、吸量管 ③计数板、显微镜 * jgyj [试剂] 特点： ①为低渗溶液，可使红、白细胞溶解破裂； ②含对E的保护剂，如乙醇、乙二醇、丙酮； ③并使E颗粒染色而被识别。 * jgyj 下列试剂任选一种: 1.伊红-丙酮稀释液 2.溴甲酚紫稀释液? 3.Hinkelman稀释液 4.乙醇-伊红稀释液? 5.皂素-甘油稀释液 6.固绿稀释液? * jgyj [操作] 0.38ml稀释液＋20μl血→混匀→RBC溶解后→混匀→充池（2个）→静置2-5min→镜下计数10个大方格E的数目。 [计算] E/L=10大方格E的数×20×106 =0.02N×109/L [参考值] 0.05-0.5×109/L * jgyj bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo