第8章同工酶分析技术8.1淀粉胶电泳的技术和方法-ResearchGate.PDFVIP

See discussions, stats, and aut hor profi les for t his publicat ion at : htt ps:///publicat ion/266396343 Isozyme analysis in genetic diversity study Chapter · J anuary 1999 CITAT IONS READS 0 26 3 authors: Long Nie Shunxue Tang Kunming Institute of Zoology CAS Dow AgroSciences 12 PUBLICAT IONS   294 CITAT IONS    109 PUBLICAT IONS   2,369 CITAT IONS    SEE PROFILE SEE PROFILE Xu J ia University of Macau 23 PUBLICAT IONS   177 CITAT IONS    SEE PROFILE All content following this page was uploaded by Shunxue Tang on 06 October 2014. T he user has requested enhancement of the dow nloaded file. 第 8 章 同工酶分析技术 由于酶是基因编码的产物，它在电场中迁移率的改变反映了酶蛋白的大小构形和肽链氨基 酸的序列变化，即编码 DNA 顺序上的变化，所以可通过分析酶谱的变化来获得我们所需要的遗 传信息。在酶谱分析中，等位酶是常用的分析工具。等位酶（Allozyme）是“等位基因酶” 的 简称，是从同工酶中派生出来的，它与同工酶既有区别又有联系。同工酶是催化同一生化反应 的、但在电场中的运动性质有所不同的同种酶的不同表现形式。这是由于构成蛋白质亚基的氨 基酸组成和顺序有所不同而造成的。这一概念是广义的，它包括不同基因座位和同一基因座位 的不同等位基因所编码的同一种酶，以及转录后酶变体的所有电泳后的表现型。近期文献所提 到的同工酶则是狭义的，仅指由不同基因座位所编码的同一种酶的不同形式。由于多数酶的不 同形式是共显性的，一个基因座位上两个或多个等位基因是能表达的，它们所编码的多肽链在 凝胶上作为酶基因的表现型都能显示出谱带而被看见，因此可将它们作为遗传学研究对象。以 下将介绍同工酶分析的一些技术和方法。 8.1 淀粉胶电泳的技术和方法 电泳有很多种支持介质，其中淀粉是最容易使用的一种。由于淀粉凝胶孔径的大小和蛋白 质分子相近，因此它提供了一个很好的分子筛。同时每一块胶都可以切成几片进行不同酶系统 的染色，因而节约时间、人力、物力和财力。淀粉胶电泳不需要任何复杂的装备，所有必须的 装备都能在实验室找到。而且，与聚丙烯酰胺比较，淀粉是无毒的，最重要的一点是，淀粉胶 上显色的结果和聚丙烯酰胺胶显色的结果一样好，多数时候甚至更好。 8.1.1 淀粉胶的制备 水解淀粉 进