UVB对人上皮细胞损伤作用的实验研究-流行病与卫生统计学专业论文.docxVIP

泰山医学院硕士学位论文 泰山医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 UVB 对人上皮细胞损伤作用的实验研究 研究生：刘建宝 专 业：流行病与卫生统计学 导 师：李群伟 教授 中文摘要 目的 探讨中波紫外线（UVB）对人上皮细胞（人胃癌细胞 SGC-7901、人永生化表皮 细胞）的损伤作用，建立 UVB 损伤人上皮细胞的模型，探讨损伤机理，为世居高原 人群的罕见病高发提供病因研究线索。 方法 体外培养人胃癌细胞SGC-7901、人永生化表皮细胞HaCaT两种上皮细胞，然后 分为四组，一组对照组，另外三组分别是低、中、高剂量照射组。其中人胃癌细胞的 照射剂量 6mJ/cm2 、 12mJ/cm2 、 18mJ/cm2 ； HaCaT 细胞的照射剂量为 10mJ/cm2 、 30mJ/cm2、60mJ/cm2紫外线照射组，每组5个平行样本。照射后12h进行检测。检测指 标有人胃癌细胞SGC-7901增殖活性（MTT法），人胃癌细胞SGC-7901形态（光学显 微镜下观察），人胃癌细胞SGC-7901凋亡形态（荧光显微镜），人永生化表皮细胞凋 亡率（流式细胞术FCM），人永生化表皮细胞DNA损伤（单细胞凝胶电泳实验）。 结果 1、UVB照射人胃癌细胞SGC-7901后可使其吸光度值下降，对照组、6、12、 18mJ/cm2紫外线照射组细胞吸光度值分别为0.671±0.179，0.318±0.009，0.257±0.201， 0.197±0.156，各组间差异有统计学意义（p0.05）。 2、UVB照射人胃癌细胞SGC-7901后，在形态学上可见细胞形态肿胀变圆，失去 与邻近的细胞的连接，细胞出现脱落，且细胞损伤程度与照射剂量有剂量依赖性。 3、UVB照射可诱导人胃癌细胞SGC-7901发生凋亡。 4、UVB照射人永生化表皮细胞可诱导其发生凋亡，且剂量越大细胞凋亡率越高。 对照组、10、30、60mJ/cm2紫外线照射组细胞早期凋亡率分别为1.2±0.14，2.23±0.37， 4.13±0.29，5.97±0.17，晚期凋亡率分别为2±0.13，7.63±0.52，23.36±0.98，40.46±1.39， 各组间差异有统计学意义（p0.05）。 5、UVB照射人永生化表皮细胞可使其细胞尾矩和Olive尾矩增大，且照射剂量越 1 大，尾矩和Olive尾矩越大。对照组、10、30、60mJ/cm2紫外线照射组细胞DNA尾矩 分别为0.13±0.25，21.78±2.31，53.48±5.66，79.16±7.47，各组间差异有统计学意义 （p0.05），Olive尾矩分别为0.32±0.47，16.17±1.96，36.43±2.89，51.71±1.87，各组 间差异有统计学意义（p0.05）。 结论 UVB 照射可使上皮细胞 DNA 产生损伤，降低其增殖活性，诱导其发生细胞凋亡， 并且呈明显的剂量依赖性，细胞 DNA 的损伤可能是高原某些罕见病的发病原因之一。 关键词 UVB；人上皮细胞；细胞增殖；细胞凋亡；DNA 损伤 2 DAMAGE EFFECT OF ULTRAVIOLET ON HUMAN EPITHELIAL CELLAS Postgraduate：Liu Jianbao Major：Epidemiology and Health Statistics Directors：Professor Qunwei Li Objective ABSTRACT To investigate the effect of UVB of different dosage on human epithelial cell(SGC-7901 cell and HaCaT cell), to construct model of human epithelial cell injured by UVB for protecting study of ultraviolet damage and provide pathogen clues of the high incidence of genetic disease in plateau area. Methods SGC-7901 cells and were RPMI1640 medium, HaCaT cell in DMEM medium, then they were exposed to different doses of UVB and subsequently incubated for 12 hours. MTT assay was used to test the proliferation activity of SGC-7901 cell. Light micr