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富贵竹愈伤组织诱导与植株再生试验研究 　　摘要以富贵竹茎段为外植体诱导腋芽，再以腋芽诱导愈伤组织，最后进行分化及植株再生，筛选出各阶段的最适培养基，即腋芽萌生为MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L，愈伤组织诱导和植株再生均为MS+6-BA 3.0mg/L＋NAA 0.3mg/L。 　　关键词富贵竹；组织培养；愈伤组织；植株再生；培养基 　　中图分类号S682.39文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)01-0016-02 　　 　　富贵竹广泛分布于亚洲热带地区，我国南方各地广泛栽植。其叶尖长，富有竹韵，柔美而坚韧，清雅而高贵；叶色墨绿有革质，光泽锃亮，叶柄基部抱茎、互生、全缘，茎杆笔直挺拔，常作盆栽供室内摆设，又可剪取茎株插瓶用清水养育作瓶花观赏，也可将剥除叶片后的茎干剪成枝条进行催芽做成外围低中心高3～18层的鸿运宝塔摆设于厅室内，还可作高级艺术插花素材，具有较高的观赏价值。富贵竹的适应性极强，容易养护管理，极耐阴，常温下只要供给足够的水分，就可正常生长。富贵竹的繁殖为扦插繁殖，繁殖速度5～7倍，很难满足产业化生产对种苗的需求(需种苗33万株/hm2)。通过组织培养途径诱导腋芽萌发，进而诱导愈伤组织和植株再生，为富贵竹的繁殖提供了一条新的途径。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1供试材料 　　富贵竹的茎段、顶芽、腋芽。 　　 　　1.2各阶段采用的培养基 　　1.2.1腋芽诱导。外植体不同部位诱导腋芽萌生能力强弱所用培养基：①6-BA 6mg/L+NAA 0.1mg/L。中下部茎断诱导腋芽萌生的培养基：②6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L；③6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L；④6-BA 2.5mg/L+NAA 0.1 mg/L；⑤6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑥6-BA 4.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑦6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑧6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.1mg/L；⑨6-BA 7.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑩6-BA 9.0mg/L+NAA 0.1mg/L。 　　1.2.2愈伤组织诱导。6-BA＋2，4-D对愈伤组织形成的影响：{11}6-BA 0.1mg/L+2，4-D 1.0mg/L；{12}6-BA 0.1mg/L+2，4-D 2.0mg/L；{13}6-BA 0.1mg/L+2，4-D 3.0mg/L。6-BA+NAA及腋芽不同切分方式对愈伤组织形成的影响：{14}6-BA 2.0mg/L+NAA 0.02mg/L；{15}6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L。腋芽纵切情况下6-BA+NAA对愈伤组织形成的影响： 　　 　　1.2.3不定芽分化及植株再生。培养基采用{16}～{24}。 　　 　　1.3操作方法 　　取0.8～1.5cm粗的茎段作为外植体，用自来水冲洗掉外部的泥土和杂物，剪成长6～8cm带1～2个芽的节段，置于0.15%升汞中处理13～15min，用无菌水冲洗3～4次，接种到诱导培养基中诱导腋芽萌动。当芽长2.5～4.5cm时，将无菌芽切下，诱导愈伤组织，继而分化出不定芽，经不断继代以达到扩大繁殖的目的。基本培养基为MS，并根据需要附加6-BA、2，4-D及NAA等激素，蔗糖30g/L，琼脂4.5g/L，pH值5.8，培养温度25±1℃，每天光照10～12h，光照强度1 300～1 500 Lx。 　　 　　2结果与分析 　　 　　2.1腋芽的诱导 　　2.1.1外植体不同部位产生腋芽情况。把经灭菌处理的不同部位富贵竹接种到培养基MS+6-BA 6.0mg/L+NAA 0.1mg/L上，经过14d培养，下部茎段腋芽开始萌动，萌发的腋芽如米粒状，光亮的白色或浅绿色。再过2d，中部茎段腋芽开始萌动，而顶部的茎段到第20天才有腋芽萌动的迹象。继续培养25～30d，下部茎段的腋芽展开伸长至2.5～3.5cm，芽粗壮而正常；中部茎段的腋芽也伸长至2.5～3.5cm，而顶部的茎段腋芽只伸长至1.5～2.5cm，芽较矮小而瘦弱。经过50d的培养和观察，结果表明茎段腋芽萌发的能力以中下部的较强，出芽率85%以上，上部的较差(见表1)。 　　2.1.26-BA＋NAA对中下部茎段腋芽诱导的影响。选取经灭菌处理的中下部茎段，接种到②～⑩号培养基组合上，以找出6-BA对腋芽诱导的影响。经50d的培养和观察，结果表明，在试验范围内，不论培养基中6-BA浓度高低均有较高的腋芽诱导率，但腋芽质量以6-BA 4.0～5.0mg/L的诱导效果较好，芽粗壮，颜色深绿，且出芽率较高，超过95%；但在其他的培养基上，芽相对较矮小而