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目的意义 卡巴氧和喹乙醇为喹喔啉类药物，作为饲料添加剂用于育成猪，具有抗菌促生长作用。 卡巴氧在动物体内迅速脱氧转化成其它代谢产物，其中消除最慢的为喹喔啉-2-羧酸(QCA)，作为残留标示物；喹乙醇在动物体内的代谢过程和卡巴氧类似，转化为脱一氧和脱二氧化合物后，进一步代谢为3-甲基喹喔啉-2-羧酸(MQCA)，在动物体内残留时间最长，规定其为残留标示物。 因卡巴氧和喹乙醇的毒副作用，1998年欧盟禁止对其使用。 样品前处理方法 准确称取组织5g置于具塞离心管中，加5％偏磷酸10％甲醇溶液8mL，旋涡混合2min，在4℃下6000r/min离心15min，取出上清液，然后再向组织样品中加5％偏磷酸10％甲醇溶液8mL重复提取一次，合并2次上清液。于上清液中加乙酸乙酯8mL，旋涡混合1min，4000r/min离心10min，取有机相层，再加乙酸乙酯8mL重复提取，合并2次有机相。有机相中，加磷酸盐缓冲液6mL，旋涡混和1min，放置10min，使下层清晰，收集水相。另用磷酸盐缓冲液6mL提取乙酸乙酯相一次。使水相清晰，合并2次水提取液。 取得的主要成果 制定了动物源食品中喹喔啉-2-羧酸和3-甲基喹喔啉-2-羧酸分 析检测的国家标准方法 Yujie Wu, Yulian Wang, Zonghui Yuan et al.J Chromatogr A , 1146 (2007):1-7 (IF 3.359) 吴玉杰, 余欢, 袁宗辉等.中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分 会第九次会议论文，217-222 Yujie Wu, Zonghui Yuan et al. Chromatogr A (审稿中) 上述分析方法应用前景分析 节省残留监控的人力、物力资源 保护人体健康，维护社会稳定 主要完成人员 * * 动物源食品中喹喔啉-2-羧酸和 3-甲基喹喔啉-2-羧酸残留检测-HPLC方法 国家兽药残留基准实验室 农业部食品安全评价重点开放实验室 2007.5 吴玉杰 标准由来 农业行业标准（农财发[2005]58号）制定和修订项目 中华人民共和国农业部公告第781号(公告－3-2006) 试剂材料 标准品及标准溶液 甲醇、乙酸乙酯、 偏磷酸、甲酸、磷酸、磷酸氢二钾、 偏磷酸甲醇溶液、氢氧化钠溶液、甲酸甲醇溶液 、磷酸缓冲液、氢氧化钠-甲醇溶液 试剂 精确称取喹喔啉-2-羧酸和3-甲基喹喔啉-2-羧酸各10 mg，用甲醇配成浓度为1 mg/mL的标准贮备液，4℃避光保存，有效期6个月 试剂配制注意事项 偏磷酸甲醇溶液：注意加热过程、浓度配比 甲酸甲醇溶液：现用现配 磷酸缓冲液：注意调节pH值 MAX柱依次用甲醇3mL、水3mL活化。加样品提取液至MAX柱中，控制流速小于3mL/min，先后用0.05mol/L氢氧化钠溶液3mL、甲醇3mL淋洗，抽干，2％甲酸甲醇溶液3mL洗脱，洗脱液置45～50℃水浴氮气吹干，加氢氧化钠-甲醇溶液200μL溶解残渣，旋涡混匀，待测。 操作步骤 液相色谱柱：Hypersil 25 cm×0.46 mm 检测波长：320 nm 柱温：30℃ 流动相：甲醇-水（40:60，v/v），加入1%甲酸 流速：1.0 mL/min 进样量：40 μL 定量方式：外标法 样品测定 图1 QCA标准溶液HPLC色谱图 图2A猪肌肉空白色谱图 图2B 猪肌肉添加2μg/kg 的QCA色谱图 测定样品色谱图-QCA 图3A 猪肝脏空白色谱图 图3B 猪肝脏添加10μg/kg的QCA色谱图 图4A 鸡肌肉空白色谱图 图4B 鸡肌肉添加4μg/kg的QCA色谱图 图5A 鸡肝脏空白色谱图 图5B 鸡肝脏添加10μg/kg的QCA色谱图 图6A 鱼肌肉空白色谱图 图6B 鱼肌肉添加4μg/kg的QCA色谱图 图7 QCA标准曲线图 标准曲线－QCA 检测限和定量限-QCA Compound Porcine muscle Chicken muscle Fish muscle Porcine liver Chicken liver CCα CCβ ? 1.0 1.7 ? 0.8 1.3 ? 0.7 1.3 ? 2.5 5.6 ? ? 2.6 4.3 Decision limit (CCα) and detection capability (CCβ)