Th17细胞因子及炎症趋化因子在日本血吸虫感染小鼠肝脏中动态表达-病原生物学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 2 中英文缩略词对照表(-) 英文简写 英文全称 中文全称 bp base pair 碱基对 cDNA complementary DNA DNA互补DNA ELISA enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 IFN-γ interferon γ干扰素 IL-4 interleukin-4 白细胞介素一4 IL-17 interleukin-17 白细胞介素一17 mIL-12 mouse interleukin 12 小鼠白细胞介素-12 CTL cytotoxi T Lymphacyte 细胞毒性T淋巴细胞 OD optical density 光密度 DC Dendritic cells 树突状细胞 TGF-b transforming growth factor-Β 转化生长因子 PBS Phosphate Buffer 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应 SEA soluble egg antigen 可溶性虫卵抗原 TNF-α necrosis factor alpha 肿瘤坏死因子 RT-PCR real time quantitative PCR 实时荧光定量PCR IBD inflammatory bowel disease. 炎症性肠炎 英文缩写词 英文全称 中文名称 EAE experimental autoimmune encephalomyelitis 实验自身免疫性脑脊髓膜炎 CIA collagen-induced arthritis, 胶原诱导性关节炎 STAT3the signal transducer and activator o STAT3 transcription 3 信号转导和转录激活子-3 IRF4 Interferon-regulatory factor 4 干扰素调控因子-4 AHR The aryl hydrocarbon receptor 芳香烃受体 TCR T cell receptor T细胞受体 Th17细胞因子及炎症趋化因子在日本血吸虫 感染小鼠肝脏中动态表达 摘 要 目的 观察日本血吸虫感染C57BL/6小鼠肝脏Th17细胞因子及其相关炎症趋化因子动 态变化和肝脏虫卵肉芽肿病变，探讨其在日本血吸虫虫卵肉芽肿病变形成中的作用。 方法 建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型，于感染后0，2，4，6，8，10和12周剖 杀小鼠，观察肝脏大体变化并测定肝脏系数；用实时荧光定量PCR（RT-PCR）方法， 检测小鼠肝脏IL-17，IL-6，TGF-β，TNF-α，IL-23，CXCL1，CXCL2和CCL11mRNA 水平；ELISA法检测肝脏细胞因子IL-17和炎症趋化因子CXCL1，CXCL2和CCL11蛋 白水平；肝脏石蜡切片，HE染色后动态观察小鼠日本血吸虫病急性期、慢性期肝脏 虫卵肉芽肿大小；结果 IL-17，IL-23，CXCL1，CXCL2和CCL11mRNA转录水平在感 染后2、4周较低，接近对正常对照鼠基础表达；但于感染后6、8和10周IL-17，IL-23， CXCL1，CXCL2和CCL11mRNA表达显著增强，明显高于正常对照(P＜0.05）；随后逐 渐下降，12周降为低水平表达。TGF-β，TNF-α mRNA转录在感染后2周开始检测到， 之后逐渐升高，感染后8周达到峰值，与对照鼠比较，P＜0.05，10、12周降为低水平 表达；且感染后6、8周细胞因子IL-17及趋化因子CXCL1，CXCL2和CCL11蛋白分泌 水平显著升高，与对照鼠比较P＜0.05； 肝脏HE染色结果表明，正常小鼠肝小叶结构 正常，汇管区无虫卵沉积，无炎症细胞浸润，无纤维组织增生，肝细胞索呈放射状排 列。感染后2周肝脏切片肝小叶结构正常，无炎症细胞浸润。4周可见虫卵，虫卵周围 有少量炎性细胞浸润，开始出现肉芽肿反应，肉芽肿面积为（5.23±O.65）×103μm2; 在 感染后6周肉芽肿反应达高峰，虫卵周围浸润大量炎性细胞，并伴有肝细胞大片状坏 死，肉芽肿外围有红色放射状无结构坏死物质，肉芽肿面积为（144.30±40.32）×103μm2; 8周肉芽肿面积逐渐缩小，且可见虫卵周围被梭形成纤维细胞和胶原包绕，10周肉芽 肿大小面积减小为（89.43±15.94）×103μm2; 第12周时肉芽肿明显缩小, 部分肝细胞变 性、坏死、有炎症细胞浸润, 虫卵周围可见到少量梭形的成纤维细胞及类上皮细胞。 从急性期开始出现虫卵肉芽肿，随感染时间延长，肉芽肿逐渐缩小，急性期与慢性期 肉芽肿大小比较，差异有统计学意义( P 0. 05)。同