UT受体拮抗剂――urantide抗大鼠心肌缺血再灌注损伤作用及其机制-药理学专业论文.docx

PAGE PAGE 2 第二部分 UT 受体下调对 urantide 抗大鼠心肌细胞缺氧再给氧损伤作用的影响 1 材料与方法………………………………………………………………………62 1.1 实验材料…………………………………………………………………… 62 1.2 实验方法…………………………………………………………………… 64 1.3 统计学处理………………………………………………………………… 71 2 结果………………………………………………………………………………72 2.1 乳鼠心肌细胞鉴定………………………………………………………… 72 2.2 乳鼠心肌细胞形态学观察………………………………………………… 73 2.3 RNA干扰对乳鼠心肌细胞UTmRNA的影响………………………………… 73 2.4 RNA干扰对乳鼠心肌细胞UT蛋白表达的影响…………………………… 75 2.5 UT受体下调对urantide抗心肌细胞缺氧再给氧损伤的影响………… 76 2.5.1对台盼蓝拒染率的影响 ………………………………………………… 76 2.5.2对细胞存活率的影响 …………………………………………………… 76 对心肌细胞培养上清中CK、LDH活性的影响…………………………… 77 对心肌细胞培养上清中肌钙蛋白含量的影响 ………………………… 78 对心肌细胞培养上清中SOD活性、MDA含量的影响……………………… 78 对心肌细胞培养上清中NO含量、NOS活性的影响……………………… 79 对心肌细胞凋亡的影响（流式细胞仪检测） ………………………… 80 对心肌细胞Hoechst33258染色的影响 ………………………………… 81 3 讨论 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 83 五、结论……………………………………………………………………………….86 六、参考文献…………………………………………………………………………88 七、附录………………………………………………………………………………96 八、致谢………………………………………………………………………………98 九、综述………………………………………………………………………………100 英文缩略词表(abbreviation) 英文缩写 A 英文全称 absorbence 中文全称 吸光度值 AAR area at risk （缺血）危险区 AMI acute myocardial infarction 急性心肌梗死 AP ammonium persulfate 过硫酸胺 bp base pair 碱基对 CHE chelerythrine chloride 白屈菜红碱 CK creatine kinase 肌酸激酶 cTnI cardiac troponin I 心肌肌钙蛋白 I d day 天 DAB 3,3-diaminobenzidine 3,3’-二氨基联苯胺 DEPC diethyl pyrocarbonate 二乙基焦磷酰胺 DMEMDMSO DMEM DMSO dulbecco’s modified Eagle’s medium dimethyl sulfoxide Pulbecco 改良 Eagle 基 二甲基亚砜 心电图 超敏化学发光试剂 ECG electrocardiogram ECL enhanced chemiluminesense GAPDH glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase 3-磷酸甘油醛脱氢酶 h（rs） HE HRP H/R ip I/R IS iv LAD LDH MDA hour(s) hematoxylin an eosin horseradish peroxidase hypoxia reoxygenation intraperitioneal injection myocardial ischemical reperfusion injury infarct size intravenous injection left anterior descending antery lactate dehydrogenase malondialdehyde 小时 苏木素-伊红 辣根过氧化物酶 缺氧/复氧 腹腔注射 心肌缺血再灌注损伤 梗塞面积 静脉注射 左冠状动脉前降支 乳酸脱氢酶 丙二醛 MI myocardial infarction 心肌梗死 min minute 分钟 MTT 3-4,5-dimethylthiazol-2-thiazolyl) -2,5-d