Treg细胞及Tim3负性调控因子在异基因造血干细胞移植后作用的研究-内科学(血液病学)专业论文.docxVIP

Treg Treg 细胞及 Tim3 负性调控因子在异基因造血干细胞移植后作用的研究 中文摘要 Treg 细胞及 Tim3 负性调控因子在异基因造血干细胞移 植后作用的研究 中文摘要 目 的：（1）通过对高危难治恶性血液病患者异基因造血干细胞移植后输注 DC-CIK 细胞中 CD4+CD25+CD127-T（Treg）细胞的检测及功能实验，探讨 DC-CIK 细胞输注物中不同比例的 Treg 细胞与恶性血液病患者移植后急性移植物抗宿主病（ aGVHD）、复发及生存的关系。（2）通过检测异基因造血干细胞移植后患者外周血中 Treg 细胞的比例及 Tim3 在淋巴细胞亚群上的表达，探讨 Treg 细胞、Tim3 与 aGVHD 发生的关系。 方 法：（1）采用流式细胞术检测高危难治恶性血液病患者在异基因造血干细胞 移植后接受 DC-CIK 细胞治疗的输注物中 Treg 细胞百分比。（2）与同期行异基因造 血干细胞移植但未接受 DC-CIK 细胞治疗的高危难治恶性血液病患者在 aGVHD、复 发及生存相比较。（3）采用流式细胞仪分选出 DC-CIK 细胞中的 Treg 细胞，运用混 合淋巴细胞反应及 MTT 比色法，进行 DC-CIK 细胞中 Treg 细胞体外抑制功能实验。 （4）采用流式细胞术检测异基因造血干细胞移植后发生 aGVHD 及未发生 aGVHD 患者外周血中 Treg 细胞的比例。（5）采用流式细胞术的方法检测异基因造血干细胞 移植后发生 aGVHD 及未发生 aGVHD 患者外周血中 Tim3 在 CD4+T 细胞、CD8+ T 细 胞、CD3-CD56+细胞及 CD4+CD25+T 细胞上的表达。 结 果：（1）32 例高危难治恶性血液病患者在异基因造血干细胞移植后接受 DC-CIK 细胞治疗，25 例患者输注的 DC-CIK 细胞来源为供体，7 例为异基因造血干 细胞移植后受体。（2）Treg/DC-CIK 细胞在 5%以下的为低比例表达组，共 10 例； Treg/DC-CIK 细胞在 5%-10%之间的为中比例表达组，共 16 例；Treg/DC-CIK 细胞在 10%以上的为高比例表达组，共 6 例。（3）DC-CIK 细胞中的 Treg 细胞与效应细胞的 效靶比在 1.3:1 时抑制功能最强。（4）异基因造血干细胞移植后接受 DC-CIK 细胞治 疗及未接受 DC-CIK 细胞治疗的高危难治恶性血液病患者从 2010 年 12 月随访至 2013 年 7 月 1 日，中位随访时间为 13.7（2-19.7）个月。接受 DC-CIK 细胞治疗的 4/32 例 I PAGE PAGE IV 中文摘要 Treg 细胞及 Tim3 负性调控因子在异基因造血干细胞移植后作用的研究 （12.50%）患者发生 I-II 度 aGVHD，其中 3 例为低比例表达组，1 例为中比例表达 组；未接受 DC-CIK 细胞治疗的 10/27 例（37.03%）患者发生 aGVHD，其中 7 例发 生 I-II 度 aGVHD，3 例发生 III-IV 度 aGVHD，接受 DC-CIK 细胞治疗的患者的 aGVHD 的发生率及程度较未接受 DC-CIK 细胞的明显降低（P0.05）；接受 DC-CIK 细胞治 疗的患者中 7/32 例（21.88%）复发，1 例为低比例表达组，3 例为中比例表达组，2 例为高比例表达组；未接受 DC-CIK 细胞治疗的患者中 8/27 例（29.63%）复发，两 组患者间的复发率无明显的统计学差异（P0.05）；接受 DC-CIK 细胞治疗及未接受 DC-CIK 细胞治疗的患者的 2 年总生存率(OS)分别为 70.31%VS52.37%（P0.05）,2 年无病生存率（DFS）分别为 64.52%VS53.84%（P0.05）。（5）异基因造血干细胞 移植后检测患者外周血中 Treg 细胞比例显示，aGVHD 患者外周血中的 Treg 细胞较 未发生 aGVHD 患者减低（P0.05）。（6）Tim3 在异基因造血干细胞移植后淋巴细 胞亚群表达检测显示， Tim3 在 aGVHD 患者外周血 CD4+T 细胞、CD8+T 细胞及 CD4+CD25+T 细胞上的表达均较未发生 aGVHD 患者升高（P0.05）；而 Tim3 在 CD3-CD56+细胞上的表达，两组间无明显统计学差异（P0.05）。 结 论：（1）DC-CIK 细胞输注物中 Treg 细胞具有免疫抑制效应，异基因造血干 细胞移植后输注 DC-CIK 细胞可以降低 aGVHD 的发生，却未明显影响移植物抗白血