第一章色分析法概论.pptVIP

Contents 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.1 色谱分析法概述 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.1 吸附色谱法 吸附色谱法:利用同一吸附剂对混合物中不同成分吸附能力的差异，而使各成分达到分离目的,是最早期的一种色谱分离技术，主要应用于某些分子量不大的物质的分离提纯 吸附是表面的一个重要性质之一。任何两相都可以形成表面，其中某相或溶解在某相中的溶质，在该表面的密集现象称为吸附。 利用固体吸附剂作为固定相，常用的固定相是硅胶、氧化铝和活性炭等,表面积越大的吸附剂，吸附能力越强。 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心，吸附剂一般与待分离化合物的极性官能团相互作用 原理（分离机制） 吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来，然后再吸附、再解吸，形成一个动态平衡。吸附色谱过程就是不断地产生吸附与解吸的矛盾统一的过程 吸附色谱示意图 X.溶质分子 Y.流动相分子 a. 吸附剂 m.流动相 1.3.1 吸附色谱法 1.3 基本类型色谱法的分离机制 一般采用含水量10-20%的硅胶（硅胶的吸附活性取决于含水量，当含水量小于1%时活性最高，大于20%时吸附活性最低）。用硅胶进行色谱分离时，要提前进行活化和纯化。纯化即降低硅胶活性，实验表明，硅胶加入4-20%水后，表面活性部位被纯化，样品溶质在吸附剂上的吸附和解吸过程加快，同时传质作用得到改善，最终柱效大幅提高。 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.1 吸附色谱法 吸附剂的选择，活性大or活性小 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.2 分配色谱法 将液体均匀地涂渍在惰性物质（载体）表面上作为固定相，利用被分离组分在固定相与流动相中的溶解度差别所造成的分配系数差别而被分离 分配色谱示意图 Xm流动相中游离的组分分子 Xs固定相中溶解的组分分子 原理（分离机制） 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.2 分配色谱法 要 求 固定相：机械吸附在惰性载体上的液体 载体：惰性，性质稳定，不与固定相和流动相发生化学反应；纯净，颗粒大小均匀 流动相：为液体或气体，必须与固定相互不相溶 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.2 分配色谱法 固定相极性大于流动相，极性小的组分先流出来，应用于分离极性及中等极性物质。固定相可选择水、各种缓冲溶液、稀硫酸、甲醇等强极性溶液及他们混合液。用被固定相饱和的有机溶剂做洗脱剂进行分离，被分离成分中极性大的亲水性成分移动慢 正向分配色谱法 流动性极性大于固定相，极性大的组分先流出，用于分离非极性至中等极性物质。常用硅油、液体石蜡等极性较小的有机溶剂作为固定液，而以水、水溶液等作为流动相。此时，被分离成分的移动情况与正相分配色谱相反 反向分配色谱法 分配色谱法 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.3 离子交换色谱法 固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心，并随着流动相的运动而运动，最终实现分离。 m 2 1 R 阳离子交换色谱示意图 1.固定离子；2.可交换离子 R.树脂骨架；m.流动相 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.3 离子交换色谱法 要 求 固定相 流动相 被分离组分 离子型的有机物或无机物 离子交换树脂 水为溶剂的缓冲溶液 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.4 空气排阻色谱法 凝胶色谱分离示意图 Ge.凝胶； m.流动相 分离机理与其他色谱法完全不同：类似于分子筛的作用，但凝胶的孔径比分子筛要大得多，一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠相互作用力的不同来分离，而是按分子大小进行分离 1.3 基本类型色谱法的分离机制 1.3.4 空气排阻色谱法 固定相：多孔性凝胶 流动相 水 有机溶剂 凝胶过滤色谱 凝胶渗透色谱 毛细管电泳 高效液相色谱 生物大分子的分离和纯化 手性分离色谱 解决药物对映异构体的分离 色谱高灵敏检测器 检测极微量环境污染物 高温毛细管 气相色谱法 适应石油化工的需要 有效快速地分离蛋白质和多肽 整体色谱法 1.4 色谱法发展趋势及应用 色谱法在食品工业中的应用 1.4 色谱法发展趋势及应用 1 2 3 色谱分离和检测手段日益丰富，分析物范围扩大同时，对传统分析物研究更为深入 样品介质日益复杂，样品前处理方法更加完善 分析方法标准化，分析目的进一步多样化 采用非抑制性离子交换色谱-间接紫外光度检测法，可在7min内测定啤酒、饮料、食盐和