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水稻Kasalath改良品系基因转化效率初步研究 　　摘要 以亲本Kasalath和HD9802S为对照，Bar基因为筛选标记，初步评价了Kasalath改良品系9K08-3、9K18-7、9K21-3、9K28-5、9K29-9和9K30-0的基因转化效率。试验共获得15个独立转化事件，9K08-3、9K18-7、9K21-3、9K28-5、9K29-9和9K30-0的基因转化效率分别为0、0.65%、0、0.23%、0.40%和0.22%；初步结果表明改良品系9K18-7具有较高的基因转化效率。 　　关键词 籼稻；基因转化效率；抗除草剂 　　中图分类号 S511 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）05-0010-03 　　Abstract The transformation efficiencies of several improved lines from Kasalath（including 9K08-3，9K18-7，9K21-3，9K28-5，9K29-9，and 9K30-0）were preliminary evaluated by using parent Kasalath and HD9802S as check and herbicide resistant gene Bar as selective marker.Fifteen independent transformants were obtained in this study，and the transformation efficiencies of line 9K08-3，9K18-7，9K21-3，9K28-5，9K29-9，and 9K30-0 were 0，0.65%，0，0.23%，0.40% and 0.22%，respectively.It primary indicated that line 9K18-7 had higher transformation efficiency comparatively. 　　Key words Indica rice；transformation efficiency；herbicide resistance 　　水稻（Oryza sativa L.）是最重要的粮食作物之一，全世界近50%的人口以稻米为主食，90%的水稻产于亚洲。亚洲栽培稻一般分为籼稻和粳稻2个亚种，其中籼稻约占全球水稻产量的80%[1]。水稻在组织培养力和基因转化效率方面对基因型依赖性强，不同基因型水稻的组织织培养力和遗传转化效率存在显著差异。由于大多数籼稻不良的组织培养特性和极低的转化效率，严重限制了转基因技术在籼稻育种上的应用[2]。研究发现Kasalath是籼稻中易于组织培养和遗传转化的品种[3-4]，但是Kasalath农艺性状较差，主要表现为高秆、有芒、株型松散、产量较低、生育期长等，严重制约了它在转基因育种研究上的广泛应用。水稻转基因育种研究中亟需转化效率高、农艺性状好的籼稻品系。 　　早籼型温敏核不育系HD9802S熟期早、农艺性状优良[5]。本课题组从HD9802S/Kasalath后代中选出了组织培养力高、矮秆、生育期短、产量性状较好的Kasalath改良品系[6]，但高培养力品系的基因转化效率尚未检测。本文报道了以农杆菌介导转化法评价Kasalath改良品系基因转化效率的初步结果。 　　1 材料与方法 　　1.1 水稻材料 　　Kasalath改良品系9K08-3、9K18-7、9K21-3、9K28-5、9K29-9和9K30-0由本课题组培育[6]；籼稻品种HD9802S由湖北大学提供；Kasalath由本所提供、本课题组繁殖。 　　1.2 组织培养和基因转化 　　组织培养方法参考文献[6]，基因转化方法参考文献[7]。根瘤农杆菌菌株EHA105由本课题组购买、保存；质粒pCAMBIA3300由澳大利亚国际农业分子生物学应用中心惠赠，本课题组扩增、保存。植物组织培养力（%）=愈伤组织诱导率×绿苗分化率×100；基因转化效率（%）=转化事件数/试验种子数×100。 　　1.3 转基因植株检测 　　PCR和Southern检测方法参考文献[8-9]。转基因植株的除草剂抗性检测：从T1代植株中选取健康叶片以1 g/L的草铵膦溶液涂抹叶上部标记部位，以受体材料为对照，7 d后观察。 　　1.4 统计学分析 　　用Excel 2013和SPSS 21.0软件对数据进行统计分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 转化事件的鉴定 　　2.1.1 PCR鉴定。转化后获得的再生植株经炼苗移栽共成活18株，其中9株来源于Kasalath、2株来源于9