婴幼儿配方粉中牛磺酸前处理优化和氨基酸分析仪分析.PDFVIP

检验检测 2016年  第22卷   第5期 婴幼儿配方粉中牛磺酸的前处理优化及 氨基酸分析仪分析 刘旭辉　刘萤　张姗　程超　裴国新　畅晓辉　张朝晖 （北京出入境检验检疫局，北京　100026 ） [摘　要]　对奶粉中牛磺酸的前处理方法、流动相比例和柱温箱温度对氨基酸分析仪测定奶粉中牛磺酸的影 响进行研究。结果表明，乙醇沉淀蛋白法能够更好地提取奶粉中牛磺酸；柱温25℃的条件下，用75%pH4.20 柠檬酸锂缓冲液B 和25%pH8.00 柠檬酸锂缓冲液C 作为流动相进行梯度洗脱提取牛磺酸，为氨基酸分析 仪测定奶粉中牛磺酸较优条件。建立的氨基酸分析仪测定方法, 该方法的相对标准偏差为0.62%, 回收率为 99.6% ～101.5%, 准确而灵敏，适合婴幼儿配方奶粉中牛磺酸的分析。 [关键词]　牛磺酸；氨基酸分析仪；分离度 中图分类号：O657　文献标识码：A　文章编号：2095-5200(2016)05-092-03 DOI：10.11876/mimt201605034 [1] 牛磺酸（Taurine ）是一种含硫的β- 氨基乙磺酸 。 内置在线真空脱气机的四元梯度输液单元；s21003K15 作为生理营养的活性物质, 对人体起着十分重要的生理 型离心机，德国Sigma 公司；N-EVAP 116 型氮吹仪， 调节作用[2] ，尤其在促进婴幼儿大脑和中枢神经系统发 美国Organomation 公司；天平：感量为 0.1mg ，德国 育，增强心血管功能以及钙吸收等方面作用突出[3], 是 Sartorius 公司。 婴幼儿食品重要的营养添加剂。 1.2　试剂和耗材 目前测定牛磺酸的主要方法有分光光度法[4-5] 、荧 缓冲液A: pH 2.90 柠檬酸锂缓冲液；缓冲液B: [6] [7-9] 光吸光光度法 、高效液相色谱法 、衍生化高效液 pH4.20 柠檬酸锂缓冲液；缓冲液C: pH8.00 柠檬酸锂 [10] [11] 相色谱法 、自动电位滴定法 、傅立叶变换红外线 缓冲液；再生液D: 柠檬酸锂缓冲液；样品稀释液：pH 光谱法[12] 等，这些方法操作烦琐, 操作要求高, 比如液 2.20 柠檬酸锂缓冲液、茚三酮溶液均购于北京捷盛依科 相色谱法仪器投入大, 分析时间长；柱前衍生法灵敏度 科技发展有限公司。浓盐酸、无水乙醇、磺基水杨酸固 高, 但操作条件要求高, 干扰比较大；分光光度法样品 体、异丙醇、甲醇均购于北京中科三环有限公司。异丙 必须通过离子交换柱纯化后才能测定。现有的国家标准 醇和甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。玻璃带塞水 GB 5413.26-2010[13] 《婴幼儿食品和乳品中牛磺酸的测 解管购于北京捷盛依科科技发展有限公司。 定》采用的是高效液相色谱法, 其中OPA 柱后衍生和 1.3　奶粉前处理方法 单磺酰氯柱前衍生法都需要复杂的衍生步骤。 1.3.1　酸水解法　称取一定量样品，精确到0.0001g ， 本研究建立了婴幼儿奶粉中牛磺酸测定的氨基酸 （使样品蛋白质含量在10 ～20mg 范围内）放于水解管 分析仪测定方法，样品经乙醇沉淀蛋白进行提取，前处 内。水解管加6mol/L 盐酸10mL，使奶粉全部溶解，摇匀。 理简单，快速，可用于婴幼儿奶粉中牛磺酸的快速定性 氮吹 10 ～20s 后，立即盖紧瓶盖。于 110℃恒温干燥 定量检测，为保证婴幼儿乳品安全提供了技术支持。 箱内放置水解22h ，取出后漩涡振摇，冷却后，在6000