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小儿咳喘灵颗粒质量标准研究 　　摘要：目的 在原小儿咳喘灵冲剂质量标准基础上建立新的质量标准控制方法。方法 在麻黄鉴别的试验方法上增加过滤；采用TLC法增加对小儿咳喘灵颗粒处方中金银花的定性鉴别；增加板蓝根有效成分氨基酸的茚三酮显色反应；增加用HPLC法测定小儿咳喘灵颗粒处方中主要成分麻黄碱的含量。结果 定性鉴别TLC法小儿咳喘灵颗粒斑点明显，阴性空白无干扰；茚三酮显色反应明显；HPLC法测定麻黄碱的含量线性范围为0.4992μg/ml～4.992μg/ml（r=0.99996），平均回收率为98.48%，RSD =1.15%（n=5）。结论 定性定量方法专属性强，重现性好，易于操作，可用于小儿咳喘灵颗粒的质量控制。 　　关键词：小儿咳喘灵颗粒；质量标准；TLC；麻黄碱；HPLC 　　小儿咳喘灵颗粒是在张仲景《伤寒论》麻杏石甘汤基础上采用科学的提取方法精制而成，收载于部颁标准中药成方制剂第四册，标准编号WS3-B-0688-91编号。该品种由麻黄、金银花、板蓝根、苦杏仁、甘草、石膏、瓜蒌七味药材组成，具有宣肺、清热，止咳、祛痰、平喘。用于上呼吸道感染，气管炎、肺炎，咳嗽等[5]。 　　原质量标准中仅有甘草皂苷的泡沫鉴别反应和麻黄的生物碱定性鉴别，无板蓝根、金银花鉴别，也无含量的测定[1]。企业申报已有国家标准的中成药中药注册9类，为提高质量标准，更有效的控制产品的质量，通过多次科学的方法试验研究，采用TLC法增加对小儿咳喘灵颗粒处方中金银花定性鉴别；增加板蓝根有效成分氨基酸的茚三酮显色反应。另针对处方中主药麻黄，特增加用HPLC法测定麻黄碱的含量，该定量方法专属性强，重现性好，易于操作，可用于小儿咳喘灵颗粒的质量控制。 　　1仪器与试药 　　1.1仪器 高效液相色谱仪：日本岛津LC-10ATvp，岛津SPD-10Avp紫外检测器，N2010色谱工作站；硅胶剂H薄层板由天津天河医疗有限公司提供。 　　1.2对照品 盐酸麻黄碱对照品（批号：171241-200303）供含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供； 　　1.3样品 由江苏神华药业有限公司生产。 　　1.4试剂 甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 　　2定性鉴别 　　2.1麻黄的鉴别 取本品10g，加水20ml使溶解，滤过，取滤液加氨试液使成碱性，再加氯仿15ml，振摇提取，分取氯仿液，置二支试管中，一管加氨制氯化铜试液与二硫化碳各5滴，振摇，静置，氯仿层显棕黄色；另一管为空白，以氯仿5滴代替二硫化碳5滴，振摇后氯仿层无色或显微黄色。 　　2.2甘草皂苷泡沫反应的鉴别 取本品10g，加水10ml，强力振摇1min，产生持久性泡沫，10min内不消失。 　　2.3板蓝根的鉴别 取本品0.3g，加水10ml使溶解，滤过，取滤液1ml，加茚三酮试液0.5ml，置水浴加热数分钟，溶液显蓝紫色。 　　2.4金银花的鉴别 　　2.4.1对照品溶液的制备 取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。 　　2.4.2供试品溶液的制备 取本品粉末0.8g，加甲醇5ml，放置12h，滤过，滤液作为供试品溶液。 　　2.4.3阴性对照溶液为甲醇溶剂。 　　2.4.4薄层层析 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10～20μl、对照品溶液10μl、阴性对照溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点。 　　3含量测定 　　3.1检测波长的选择 选择盐酸麻黄碱的最大吸收波长254nm作为检测波长。 　　3.2色谱条件 色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：甲醇-水（1：1）为流动相；检测波长为254nm；柱温25℃。在此色谱条件下，盐酸麻黄碱的理论板数达到3000以上，与其他化合物的峰达到基本分离。 　　3.3对照品溶液的制备 精密称取盐酸麻黄碱对照品12.5mg，置100ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置25ml容量瓶中，加入高碘酸溶液（0.25→10）1ml，0.25mol/L氢氧化钠溶液2.5ml，摇匀，放置30min，用0.5mol/L的盐酸溶液调至pH至7，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 　　3.4供试品溶液的制备 取本品，研细，取约3g，精密称定，置蒸馏瓶中，加5mol/L的氢氧化钠溶液120ml，摇匀，加氯化钠7.5g，超声处理10min，蒸馏，用预先盛有0.5mol/L的盐酸溶液5ml的100ml量瓶收集蒸馏液近95ml，加水至刻度，摇匀。精密量