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不同产区牡丹内生菌研究-植物学专业论文
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I
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不 同 产 区 牡 丹 内 生 菌 研 究
摘 要
常用中药牡丹皮(Moutan Cortex)为毛茛科(Ranunculaceae)芍药属(Paeonia) 牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的干燥根皮,主产安徽铜陵、亳州以及河南洛阳、 山东菏泽,其中安徽铜陵是公认的牡丹皮道地产区。本研究在实验室前期研究的基础 上,着重对非道地产区牡丹内生菌进行分离、鉴定并与道地产区牡丹内生菌种类构成 进行了比较,同时测定了牡丹内生菌的抑菌性,优化了内生菌发酵工艺,探讨了内生 菌对组培苗生长的影响。具体研究结果如下:
1. 从亳州、洛阳和菏泽产区牡丹根部分离到内生菌 7 属 26 种,其中内生细菌 3 属 13 种、内生真菌 4 属 13 种,优势属为芽孢杆菌属和青霉属;通过与道地产区内生 菌种类构成进行比较,芽孢杆菌属、假单胞属、青霉属和镰刀属为道地与非道地产区 所共有。
2. 采用滤纸片法、抑制菌丝生长速率法对内生菌进行抑菌活性研究表明:76.92% 的内生菌对病原细菌有不同程度的抑菌性,内生细菌 X11、X23 和 X27、内生真菌 Z14 对三种病原细菌均表现出抑菌性,内生细菌 X27、X21 发酵液对金黄色葡萄球菌 作用产生的抑菌圈直径为 16.1mm 和 17.3mm。对病原真菌产生抑菌作用的内生菌占 总数的 50%,其中内生细菌 X27 对西瓜枯萎病菌的抑制率、内生细菌 X23 对青霉和 西瓜枯萎病菌的抑制率均在 50%以上。内生真菌 Z23 对青霉的抑制率为 64.7%,内生 真菌 Z21 对黑线炭疽菌的抑制率达到 72.1%。
3. 通过对一株具有抑菌活性的内生菌株进行合适的碳、氮源筛选,筛选出的碳 源为可溶性淀粉、氮源为牛肉膏,采用正交实验进行发酵条件的优化,最佳抑菌发酵 组合为:5%接种量、20%装液量和 180r/min 的转速,各因素对发酵的影响的大小顺 序为接种量、转速和装液量。
4. 内生菌对凤丹种胚发芽率和组培苗生长影响的研究表明:44.4%内生优势菌和 抑菌活性菌具有促生作用,经菌 J3、J9 发酵液处理过的种胚萌发率高于对照组,菌 J8 抑制了种胚的萌发。在所接种的内生菌组培苗中,菌 J1 促进组培苗生长且地上鲜 重与地下干重均高于对照组;菌 J4 可以提高组培苗地下鲜重和干重。
关键词:药用植物;内生菌;抑菌性;发酵;组织培养;牡丹
II
II
Research on endophyte of Paeonia suffruticosa from different producing areas
Abstract
Moutan Cortex is the dried root bark of Paeonia suffruticosa Andr., which is a kind of common used Chinese medicinal material.
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