应用表型性状进行矮牵牛自交系亲缘关系研究.docVIP

应用表型性状进行矮牵牛自交系亲缘关系研究 　　一、前言 　　 　　矮牵牛(Petunia hybrida Vilm．)，又名碧冬茄、撞羽朝颜和灵芝牡丹，属于茄科矮牵牛属，是园林中应用的Petunia杂交品种的全称，其花色类型丰富，花期长，应用范围广，一直被喻为“世界花坛花卉之王”。 　　形态学标记是最初的遗传标记，是利用对植物的形态观察结合野外调查、标本采集、移栽和子代测定等手段来检测物种的遗传多样性。该方法具有直观、简便、快速的特点，是对园林植物进行品种分类的基本方法。 　　矮牵牛在我国被广泛应用于园林绿化之中，但矮牵牛多采用从国外进口的杂交种,价格十分昂贵。本研究希望通过形态标记对本课题组选育的15个矮牵牛自交系进行亲缘关系分析，类群鉴定, 为矮牵牛的亲本选配和杂种优势预测提供理论依据，从而为选育出观赏性较高，整齐稳定的F1代种子打下基础，初步探索亲缘关系在矮牵牛育种中的应用。 　　 　　二、材料与方法 　　 　　1.实验材料 　　供试材料为15份矮牵牛自交系。包括本课题组通过系谱法选育的14个自交系，和由荷兰自由大学惠赠的V26（实验用自交系材料），其中7份自交7代，7份自交6代。见表1 　　 　　 　　2.方法 　　(1)试验地点和设计 　　供试材料同时于 2006年10月19日播种于穴盘中，待真叶长到4-5片时，移栽于华中农业大学实验基地，栽培管理条件同一般生产。 　　(2)表型性状调查 　　在矮牵牛盛花期时，从每个自交系中随机抽取10份材料参考Ando等（2005）的方法结合实际情况使用游标卡尺测量花径、雌蕊长、花筒长、花萼长等16项数量指标。其中除花径在田间测量外，其余数据均在实验室进行。具体测量方法及标准见表2 　　 　　注：1.所有的长度在不另加说明的情况下，都在自然伸展状态下测量 　　 2.本文用性状标号加名称的方法表示某一自交系的特定性状，如：X1A表示自交系A的花。 　　(3)数据分析 　　聚类分析采用NTSYS-pc 2．10e（Numerical Taxonomy System， Exeter Software）软件进行数据分析。 　　 　　三、结果与分析 　　 　　1.表型测量结果分析 　　测量结果显示，在所观察的16个数量性状中，自交系内，大部分性状变异系数较小，多数在10%以内。说明了材料经过6、7代自交系自交后，各性状基本稳定，控制这些性状的基因是纯合的。相比之下，同生长发育相关的性状柱头x（X6）、柱头y（X7）、子房x（X8）、子房y（X9），同环境因素相关的性状花葶长（X10）变异较大，不过绝大多数也在20%以内。 　　为比较各性状在自交系间的差异是否明显，我们对以上性状进行方差分析。由上表可知，各表型性状在自交系间均存在显著差异，说明本文所选取的性状特异性较强，故可以利用上述16个性状的差异，对15个自交系进行聚类分析。 　　2.表型性状聚类分析 　　本文利用上述16个性状的差异，对15个自交系进行了聚类分析，聚类分析结果如图1所示： 　　 　　遗传距离是进行聚类分析的相似性统计量，两种质间的遗传距离越大表明它们间存在的变异越大，亲缘关系越远。在树状聚类图中，遗传距离的范围为1.33－8.19。A与其它的自交系的遗传距离最大，为8.19，表明A的形态同其他自交系之间存在着很大的变异。而S、110、V三者之间，V26和白两者之间的遗传距离较小，其中S和110之间的遗传距离最近，为1.33。 　　将聚类结果转换为协表征矩阵，对协表征矩阵和相似系数矩阵的相关性进行Mantel检验，结果表明两种矩阵显著相关，相关系数为0.85（r≥0.9 时，极显著相关；0.9≥r≥0.8时 显著相关），表明聚类结果能够很好的体现了自交系之间的遗传关系。 　　 　　四、讨论 　　 　　1.基于表型的聚类分析 　　本研究通过对表型性状的聚类分析将15份自交系分为4组。同我们所观察到的自交系的颜色相比，分类结果没有揭示里面有什么必然联系。但是从聚类结果上看,分类的结果同花径有一定的关系。四种花径最大的自交系被两两聚在一起。另外第三组还刚好可以分为大花、中花、小花三个亚组。这可能由于花径作为重要的育种目标，能够在一定程度上从亲缘关系上显现出来。 　　2.表型性状的选取 　　多元统计法分析中的许多步骤如，性状的选取、编码、数量标准化以及采用何种聚类方法等，都是主观确定的，其中又以性状的选取主观性最强，不同方法往往产生不完全相同的结果，而选好合适的性状对于分类工作至关重要。 　　性状的同源性、稳定性和相关性是数量分类中性状选取问题的核心。本研究在选取分类性状时着重考虑了这些方面的因素，由于自交系一般来源于种内杂交，同一性状应该具有很强