影响酶促反应速度外因研究.docVIP

影响酶促反应速度外因研究 　　摘要 酶促反应动力学研究的是各种外界因素对酶促反应速度的影响。综述了影响酶促反应速度的外界因素，如底物浓度、酶浓度、pH值、温度、激活剂和抑制剂等的作用原理。 　　关键词 酶促反应速度；外因；底物浓度 　　中图分类号 Q55.02文献标识码A文章编号11007-5739（2008）18-0238-02 　　 　　由于酶的化学本质是蛋白质，凡能影响蛋白质的理化因素都可以影响酶的结构和功能。活性中心是酶催化作用的关键部位，凡能影响活性中心发挥作用的因素都可影响酶的催化活性，进而影响酶促反应速度。酶促反应速度受许多因素的影响，这些因素主要包括底物浓度、酶浓度、pH值、温度、激活剂和抑制剂等。研究某一因素对酶促反应速度的影响时，保持反应体系中其他因素不变。 　　 　　1底物浓度对反应速度的影响 　　 　　在酶的浓度不变的情况下，底物浓度对反应速度的影响呈现矩形双曲线（如图1）。在底物浓度很低时，反应速度随底物浓度的增加而急骤加快，两者呈正比关系，表现为一级反应。随着底物浓度的升高，反应速度不再呈正比例加快，反应速度增加的幅度不断下降。如果继续加大底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。此时，无论底物浓度增加多大，反应速度也不再增加，说明酶已被底物所饱和，此时的速度称最大速度Vmax。 　　根据中间产物学说，Michaelis和Menten在前人工作的基础上，经过大量的实验，于1913年前后提出了反应速度和底物浓度关系的数学方程式，即著名的米-曼方程式： 。式中，V max指该酶促反应的最大速度，[S]为底物浓度，Km是米氏常数，V是在某一底物浓度时相应的反应速度。当底物浓度很低时，[S]＜＜Km，则V≌Vmax [S] /Km，反应速度与底物浓度呈正比；当底物浓度很高时，[S]＞＞Km，此时V≌Vmax，反应速度达最大速度，底物浓度再增高也不影响反应速度。 　　 　　2酶浓度对反应速度的影响 　　 　　在一定的温度和pH值条件下，当底物浓度大大超过酶的浓度时，酶的浓度与反应速度呈正比关系（如图2）。 　　 　　3pH值对反应速度的影响 　　 　　酶反应介质的pH值可影响酶分子，特别是活性中心上必需基团的解离程度和催化基团中质子供体或质子受体所需的离子化状态，也可影响底物和辅酶的解离程度，从而影响酶与底物的结合。只有在特定的pH值条件下，酶、底物和辅酶的解离情况，才最适宜于它们互相结合，并发生催化作用，使酶促反应速度达最大值，这种pH值称为酶的最适pH（optimum pH）（如图3）。动物体内多数酶的最适pH值接近中性，但也有例外，如胃蛋白酶的最适pH值约1.8，肝精氨酸酶最适pH值约为9.8。最适pH值不是酶的特征性常数，它受底物浓度、缓冲液的种类和浓度以及酶的纯度等因素的影响。 　　 　　4温度对反应速度的影响 　　 　　化学反应的速度随温度增高而加快，但酶是蛋白质，随温度的升高酶会发生变性。在温度较低时，前一影响较大，反应速度随温度升高而加快，一般地说，温度每升高10℃，反应速度大约增加1~2倍，但温度超过一定数值后，酶受热变性的因素占优势，反应速度反而随温度上升而减缓，形成倒V形或倒U形曲线（如图4）。在此曲线顶点所代表的温度，反应速度最大，称为酶的最适温度（optimum temperature）。 　　从动物组织提取的酶，其最适温度多在35～40℃之间，温度升高到60℃以上时，大多数酶开始变性，80℃以上，多数酶的变性不可逆。酶的活性虽然随温度的下降而降低，但低温一般不破坏酶。温度回升后，酶又恢复活性。临床上低温麻醉就是利用酶的这一性质以减慢组织细胞代谢速度，提高机体对氧和营养物质缺乏的耐受性，以利于进行手术治疗。 　　酶的最适温度不是酶的特征性常数，这是因为它与反应所需时间有关，酶可以在短时间内耐受较高的温度；相反，延长反应时间，最适温度便降低。 　　 　　5激活剂对酶促反应速度的影响 　　 　　能使酶活性提高的物质，都称为酶的激活剂（activator），其中大部分是离子或简单的有机化合物，如Mg2+是多种激酶和合成酶的激活剂；Cl-动物唾液中α-淀粉酶的激活剂。 　　 　　6抑制剂对反应速度的影响 　　 　　凡能使酶的活性下降而不引起酶蛋白变性的物质，都称为酶的抑制剂（inhibitor）。使酶变性失活（称为酶的钝化）的因素如强酸、强碱等，不属于抑制剂。通常抑制作用分为可逆性抑制和不可逆性抑制2类。 　　6.1不可逆性抑制（irreversible inhibition） 　　不可逆性抑制作用的抑制剂（I），通常以共价键方式与酶（E）的必需基团进行不可逆结合形成酶―抑制剂复合物（EI）而使酶丧失活性，按其作用特点，