猪人工授精实验室关键技术标准.pptVIP

猪人工授精－实验室关键技术 中国农业大学动物科技学院 朱士恩 zhushien@cau.edu.cn Tel: 0102007.04.26 报告内容 猪人工授精的历史及现状 猪人工授精的意义 猪人工授精的实验室设备 猪精液的采集 精液采集前的准备工作 猪的人工采精方法 手握采精法 猪精液的品质检查 精液的外观检查 精液的显微镜检查 精子活率检查 精子密度检查 精子计数 精子计数 精子计数室及一个中方格 精子计数方法 计算公式 1ml原精液内的精子数＝5个中方个数的精子数×5 ×10 ×1000 ×稀释倍数 （如为原精液不× 稀释倍数） 精子畸形率检查 仪器观察精子活力及膜的完整性 猪精液的保存处理 精液的稀释 精液的分装 稀释后分装的猪精液 精液的保存 精液的冷冻及解冻方法 (Westendorf et al. 设计， Bwanga et al 改进) 精液的运输 输精 人工授精（Artifical insemination：AI） 借助于专门的器械，用人工的方法采取公畜精液，经体外检查与处理后，再输入发情母畜的生殖道内，使其受胎的一种繁殖技术。 人工授精技术包括： 采精?精液品质评定?稀释?保存?运输?输精等环节。 输精的时间 猪发情症状与人工授精最佳时间 输 精 方 法 宫颈输精法 猪人工授精 精子在母畜生殖道运行中的损耗 精子在受精前的准备（精子获能与顶体反应） 精子在母畜生殖道内存活时间和维持受精能力的时间 各种家畜精液的稀释倍数和输精剂量 冻精解冻和输精过程中应注意的事项 解冻水浴温度应为39℃适宜; 三防( 寒、热、光 )，一快( 输精时间 ); 保证有效精子数( 活率0.3 ); 严格操作规程( 卫生、消毒、禁止吸烟、解冻方式要规范 ); 检查卵泡的发育程度（内窥镜输精法）。 猪人工授精最佳部位 猪腹腔内窥镜于子宫角输精 输精时间 第一次输精：出现静立反射后12h左右进行 第二次输精：第一次输精后8~12h进行 竖耳，阴部红肿，出现静立反射 母猪接收公猪或其它母猪的爬跨 有爬跨其它母猪的行为 发情母猪表现 受精率： 静立前一天：10%；静立第一天：70%；静立第二天：98%；静立第三天：15% 最佳时间：静立后12~24h 子宫颈输精法 intra-cervical insemination，intra-CAI 子宫内输精法 post-cervical insemination，post-CAI 子宫角输精法 deep uterine insemination，DUI 消毒清洁双手，戴上消毒手套 清洁母猪外阴、尾根及臀部周围 取出灭菌后的输精管，在其前端涂上润滑剂 将输精管45℃向上插入母猪生殖道内直到子宫颈 取出精液轻轻摇匀，去除瓶嘴，接输精管，输精 输精完毕后抽出输精管 输精流程 输精次数 一个情期内输精两次(间隔8~12 h) 射精后的精子在母畜生殖道内要通过三道屏障： 子宫颈?子宫腺窝与宫管结合部?壶峡连接部 4～20h 12～16h 8～12h 18～20h 维持受精能力 6d 48h 50h 15～56h 维持存活时间 马 羊 猪 牛 动物品种 0.2~0.5 0.1 1:1~3 羊 2.5~5.0 20~30 1:1~3 马 0.1~0.5 1~1.5 1:10~40 牛 10~20 30~50 1:1~3 猪 有效精子数（亿） 输精计量（ml） 稀释比例 家畜种类 * * 猪人工授精的历史及现状 猪人工授精的实验室设备 猪人工授精的意义 猪精液的人工采集 猪精液的品质检查 猪精液的保存处理 猪精液处理后输精 该技术始于20世纪30年代，已有70多年的历史 我国始于上世纪50年代，未达到理想的推广程度 20世纪90年代后，该技术得到迅速普及 目前该技术已成为猪配种繁殖的主要手段之一 减少饲养头数，充分发挥优秀公猪的遗传潜力 减少疾病传播，提高生产效率，获得更高的经济效益 与繁殖控制技术结合，利于现代化养猪技术体系建立 精液保存技术的发展，加快猪育种进程 公畜使用不受其生理年限限制 便于引入外源群体基因，加快遗传进展的扩散速度 实现科学养猪，养猪生产规模化，现代化的重要手段 精液的冷冻保存，可降低活体保种成本，防止基因漂变 仪 器 显微镜、精子密度测定仪、电子天平 、恒温水浴 锅、恒温精液保存箱、pH计（试纸）、 精子计数 数器、移液器等 器 皿 温度计、量筒、烧杯、保温瓶、采精杯、玻璃棒等 消耗品 纱布、输精瓶、输精管、乳胶手