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红掌组织培养中不定芽诱导及增殖研究
摘要:目的:探析优化红掌组织培养中不定芽诱导及增殖的培养基比例。方法:选用“红粉佳人”品种红掌组织,以叶柄作为初代培养,分别选用MS培养基(100%比例)、MS培养基(50%)、MS培养基(25%)进行诱导不定芽培养;对红掌愈伤组织做分化处理,添入浓度不一的细胞分裂素6-BA(0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L),生长素IBA(0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L),生长素NAA(0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L),评估红粉佳人愈伤外植体培养不定芽诱导及分化增殖的变化特征。结果:MS培养基(100%比例)对红粉佳人品种红掌组织愈伤不定芽诱导效果及增殖系数最高,MS培养基(25%)最低,不同梯度MS培养基的诱导效率、增殖系数差异明显(P0.05);0.5mg/L的6-BA对红掌愈伤组织的不定芽诱导率、增殖系数最小,1.0mg/L的6-BA可明显促进不定芽诱导率、增殖系?堤嵘?;0.1mg/L生长素IBA对红掌愈伤组织的不定芽诱导率最小,当生长素IBA≥0.3mg/L可明显促进不定芽诱导率提升(P0.05),0.1mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为57.39%,0.3mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为72.03%,0.5mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为64.37%,0.7mg/L生长素NAA对不定芽诱导率为91.89%,表明生长素NAA用于红掌愈伤组织不定芽诱导仅在0.7mg/L水平才具备良好效果。结论:红掌组织培养中选用100%完整配比的MS培养基与1.0mg/L细胞分裂素平6-BA联合0.3 mg/L 生长素IBA作为不定芽诱导及增殖的最佳培养配比。
关键词:红掌组织;外植体培养;不定芽诱导;增殖
中图分类号: S682.14 文献标识码: A DOI编号: 10.14025/j.cnki.jlny.2018.12.020
20世纪70年代红掌组织培养技术即得以拓展并建立一整套科学系统的外植体培养规范[1],由此红掌的培养有常规分株繁殖转变呈组织快速繁殖培养转变,并为优质种苗的培养提供基础。研究发现,红掌组织培养过程可受到不定芽诱导与增殖的差异造成红掌培养质量参差不齐,严重时可对种苗的生根产生不良及红掌植株发育。本文以“红粉佳人”品种红掌组织作为研究,采取不同的MS培养基、细胞分裂素6-BA、生长素IBA、NAA进行解析,旨在探析优化红掌组织培养的培养基比例[2]。
1材料与方法
1.1材料
花卉市场购得“红粉佳人”红掌盆栽植物,取材叶柄进行初代培养。
1.2方法
将叶柄初代培养,诱导愈伤组织,做切块处理,单块直径0.5~1cm,再行不定芽诱导培养基内进行诱导不定芽,随后将诱导所得出的不定芽依据自然形态进行切割,实施增殖基培养。条件设置:光照13h每天,温度25℃,光照1000~1500lx,分别选用MS培养基(100%比例)、MS培养基(50%)、MS培养基(25%)进行诱导不定芽培养;对红掌愈伤组织做分化处理,添入浓度不一的细胞分裂素6-BA(0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L),生长素IBA(0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L),生长素NAA(0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L),开展多组研究同期进行,对不同不定芽诱导增殖处理方案进行分析。
1.3项目调查
红掌组织培养60d,记录各类不同不定芽诱导增殖方案的诱导率、污染率,计算增殖系数(增殖的丛生芽数÷接种芽数)。
愈伤组织分化率=分化出不定芽的愈伤组织块数÷接种的愈伤组织块数×100%。
1.4统计学方法
数据经SPSS19.0软件分析,(P0.05)则差异有统计学意义。
2结果
2.1 不同浓度MS培养基对红掌组织不定芽诱导及增殖效果分析
选用MS培养基(100%比例)、MS培养基(50%)、MS培养基(25%)作为梯度研究,结果证实,MS培养基(100%比例)对红粉佳人品种红掌组织愈伤不定芽诱导效果最高,MS培养基(25%)不定芽诱导效果最低,不同梯度MS培养基的诱导效率差异明显(P0.05);MS培养基(100%比例)对红粉佳人品种红掌组织愈伤不定芽增殖系数最高,MS培养基(25%)不定芽诱导效果最低,不同梯度MS培养基不定芽增殖系数差异明显(P0.05),见表1与图1。
2.2 不同浓度细胞分裂素6-BA对红掌组织不定芽诱导及增殖效果分析
红掌愈伤组织先行采取100%浓度MS培养基与0.3mg/L 生长素IBA培育,并配合选择添入浓度不一
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