葡萄汁跟葡萄酒微生物分析_微生物的监测_分类跟计数_国际标准.pdfVIP

1999 . 4 (总 133) 酿 　酒 　　　　　 ·6 1 · ( 葡萄汁和葡萄酒微生物分析 微生物的监测 、 分类和计数) 国际标准 李 　华 　刘延琳 　王 　华 ( 西北农业大学葡萄酒学院 陕西杨凌 , 7 12 100) ●　目的 ( ) 微生物分析的目的是 , 监控酒精发酵和 或 苹果酸 ———乳酸发酵的进程 , 显示可能的微生物病 害 , 以便在葡萄酒酿造的各个阶段及最后产品中监测出所有的不正常现象 。 ●　注意 所有的操作必须利用无菌材料 , 以满足在微生物学工作中的无菌条件 。在进行微生物分析前 , 必 须正确取样 。 ●　实用范围 微生物分析实用于葡萄酒 、葡萄汁 、发酵醪 、蜜甜尔以及微生物破败后的上述产品。 ●　微生物分析技术 根据不同的需要 , 微生物的分析可采用下列技术 。 1 稳定性试验 11 　氧化试验 12 　培养箱试验 2 微生物检测 、鉴定和酵母菌直接计数 2 1 　液体或沉淀物的直接镜检 2 2 　亚甲基蓝活体染色 2 3 　革兰氏染色 2 4 　酶分析 2 5 　酵母菌直接镜检计数 3 微生物培养计数 31 　固体培养基培养 311 　平板培养法 (活菌计数) ( ) 312 　滤膜法 滤膜培养法 ( ) ( ) 32 　液体培养基培养 — 最大可能数 N PP 4 用具 ( ) ( ) 无菌操作室 ; 超净工作台: 培养箱 20 ℃- 35 ℃, 带温度计 ; 烘箱 干燥箱 ; 干燥灭菌箱 ( ) 气瓶 ; 高压蒸汽灭菌锅 。 180 ℃, 带温度计 ; CO2 显微镜 ; 精度为 ±0 1 的p H 仪 ; 离心机 ; 水浴锅 ; 酒精灯 ; 电炉 ; 精度为 0 1mg 的天平 ; 血球 ( ) 计数板 ; 载玻片 ; 盖玻片 ; 滤纸 ; 油浸物镜用油 香柏油 ; 本生灯 ; 70 %和 95 %的酒精 。 μ 除菌膜过滤设施 : 微孔滤膜 , 直径 13mm 或 25mm , 孔径 022 m ; 平底漏斗 ; 抽滤瓶 ; 真空泵等 。 ( ) 100ml 和 1000ml 容量瓶 ; 5 、100 、300 、500 、1000ml 移液管 或量筒 ; 经消毒的 1 、10 、15 、 20 和 25ml 吸管 ; 经消毒的离心管 ; 备注 : 亦可使用等效的其它设备 。 5 取样技术 所取样品应具代表性 , 可分别用取样阀或长玻璃管在酒罐或木桶中取样 。但在取样前应对环境进 行消毒以防微生物污染 。如用取样阀取样 , 应在取样前先放出数升 。此外 , 应用 70 %的酒精或灼烧 本文是根据 O IV 决议 O ENO 8/ 95 编译的 ·62 · 　　　　　酿 　酒 1999 . 4 (总 133) 对接触表面消毒 。