改进EBSS培养液与常用商品化试剂对鼠胚体外发育影响.docVIP

改进EBSS培养液与常用商品化试剂对鼠胚体外发育影响 　　[摘要] 目的 利用改进后的EBSS（SIGMA）培养液和常用商品化培养液G1/G2（Vitrolife），Quinn’s1026/Quinn’s1029（SAGE）对昆明系小白鼠胚胎进行体外培养，以对新建IVF实验室进行评估。 方法 对简单培养液EBSS进行改进，分别制得卵裂培养液和囊胚培养液以构成序贯培养系统。卵裂培养液： EBSS中加入适当浓度的丙酮酸钠，乳酸钠以及5种非必须氨基酸；囊胚培养液： EBSS中加入适当浓度的5种非必须氨基酸及6种必须氨基酸。将胚胎分成4组，A组使用EBSS （Earle’s Balanced Salt Solution）培养液，B组使用改进后的EBSS培养液，C组使用G1和G2培养液，D组使用Quinn’s1026和Quinn’s1029培养液，四种培养液均添加10%人血清白蛋白。结果 72 h后，鼠胚总体囊胚形成率为70.57%（614/870），其中A组的囊胚形成率为26.21%（27/103），B组为72.22%（143/198），C组为73.81%（155/210），D组为80.50%（289/359）B，C，D 3组的囊胚形成率显著高于A组（P0.001）。 结论 通过鼠胚体外培养，对新建试管婴儿实验室进行了较好的质控检测，经改进后的EBSS培养液在鼠胚囊胚形成率上与商品化序贯培养液G1/G2，Quinn’s1026/Quinn’s1029相近，均远高于简单培养液EBSS，但前者成本较之常用商品化试剂有大幅度的降低，说明改进的EBSS培养液在鼠胚体外培养上具有较好的实用价值。 　　[关键词] EBSS；培养液；鼠胚培养；囊胚；质量控制 　　[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）05（b）-0007-03 　　Effects of Improved EBSS Culture Media on the Development of Mouse Embryos in Vitro Compared with Common Commercial Media 　　RAO Jin-peng1，JIN Min1，JIN Fan2 　　1.Centre for Reproductive Medicine， The Second Affiliated Hospital， Zhejiang University， School of Medicine， Hangzhou， Zhejiang Province， 310052 China；2.Womens Hospital， School of Medicine， Zhejiang University， Hangzhou， Zhejiang Province， 310006 China 　　[Abstract] Objective Using improved EBSS（SIGMA） culture media and common commercial media G1/G2（Vitrolife） and Quinns1026/Quinns1029（SAGE） to culture mouse embryo of Kunming species in vitro for the assessment of a newly constructed IVF laboratory. Methods Modifying simple culture media EBSS by adding proper concentration of sodium pyruvate， sodium lactate and 5 nonessential amino acids to make cleavage stage media and adding proper concentration of 5 nonessential amino acids and 6 essential amino acids to make blastocyst stage media. 2-cell mouse embryos with normal morphology were collected and divided into 4 groups. Group A was cultured in EBSS （Earles Balanced Salt Solution）， Group B was cultured in improved EBSS media， group C was cultured in G1/G2， group D was cultured i